Исследование антиоксидантной активности фитопрепарата Тигровый глаз - орто презентация

Содержание

Действие активных форм кислорода (АФК) на клетки и ткани Доза АФК Low High Выживаемость Гибель Апоптоз Некроз Задержка роста и старение Митогенетическое и пролиферативное действие

Слайд 1Исследование антиоксидантной активности фитопрепарата «Тигровый глаз - орто»
Лункин В.В., Поляшова Т.И.
НПФ

«МЕДИКОМЕД»

Слайд 2Действие активных форм кислорода (АФК) на клетки и ткани
Доза АФК
Low
High

Выживаемость
Гибель

Апоптоз
Некроз
Задержка

роста
и старение

Митогенетическое и
пролиферативное
действие

Воздействие активных форм кислорода
в высоких концентрациях
на клетки и ткани приводит к их повреждению и гибели,
что является причиной многих заболеваний.

АФК в низких дозах
способствуют выживаемости


Слайд 4D A N G E R
Chemicals
Radiation
Microbial and virus infection

Free radicals
ROS

DNA damage

Carcinogenesis

Endogenic
Exogenic

?
Oxygen

radicals
scavengers



Слайд 5Предпосылки работы. Природные соединения и их композиции являются потенциальными экзогенными «ловушками»

АФК и других свободных радикалов и требуют научного анализа для их практического применения.

Задача работы состояла в исследовании антиоксидантной активности препарата
«Тигровый глаз – орто» на экспериментальных моделях in vitro: нефракционированной крови человека, изолированных гранулоцитах крови человека, ферментативной бесклеточной среде.

Слайд 6Объект и Метод
Работа проведена на клетках периферической нефракционированной крови, изолированных гранулоцитах

человека
и на модели ферментативной реакции

Интенсивность генерации АФК была оценена
по люминол-зависимой хемилюминесценции с использованием хемилюминометра ХЕМИЛЮМ-12, который позволяет проводить измерения одновременно в 12 образцах.
Прибор разработан в Лаборатории клеточной нейробиологии Института биофизики клетки РАН.






Слайд 7ХЕМИЛЮМ-12 Хемилюминометр роторный 12-ячеечный

ХЕМИЛЮМ-12 работает с пробами объемом от 0,1 до 0,3

мл, помещаемыми одновременно в 12 ячеек. В процессе регистрации на экране монитора выстраиваются 12 графиков; через каждые 2,5 секунды на каждом из них ставится очередная точка.
Одновременная регистрация хемилюминесценции от 12 проб позволяет получить серию измерений с использованием минимального количества исследуемого материала.
Высокая чувствительность при стабильном уровне нуля, возможность регистрировать быстрые изменения хемилюминесценции, - все это при большом числе одновременно анализируемых проб малого объема - главные отличительные черты прибора.



Слайд 8Препарат «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ - орто»
дозозависимо понижал уровень продукции активных форм

кислорода (АФК) в цельной крови человека. Высокий уровень АФК в крови является опасным и высокореактивным повреждающим фактором для клеток и тканей организма.

Проявление антиоксидантных свойств
препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто» в цельной крови человека


Слайд 9Нейтрофил - полиморфноядерный нейтрофильный гранулоцит
Фагоцитоз
Дегрануляция
Респираторный взрыв
Фагоцитоз зимозана нейтрофилом


(с любезного разрешения
Dr. K.B.Pryzwansky)

5 мкм

1 – прикрепление частицы зимозана;
2 – образование псевдоподии вокруг зимозана;
3 - поглощение


Слайд 10Респираторный взрыв
2NADPH + 4O2 = 2NADP+ + 4O2- + 2H+
0,5-1

nmol/мин/106 клеток

Повышенная утилизация глюкозы
Усиленное потребление О2
Активация гексозомонофосфатного пути
Усиленная продукция активных форм кислорода



Активированная продукция АФК

Спонтанный уровень продукции АФК


Слайд 11
Реактивные формы кислорода
HOCl
1O2
OH·
H2O2
O2-·
NO2·



SOD
O2-·
O2
O2

H2O2

H2O
H2O
Fe2+
Fe3+

NO
MPO

OONO-
HOONO



H2O

+ Cl-
nitrogen
dioxide
radical
peroxynitrite
anion
nitric
oxide
hydrogen
peroxide
hydroxyl
radical
singlet
oxygen
hypochlorus
acid
superoxide
anion radical


Слайд 12Антиоксидантные свойства препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто»
Препарат «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ –

орто»
дозозависимо понижает высокий уровень спонтанной
продукции АФК изолированными нейтрофилами человека

Клетки были инкубированы с ТГ-орто в
возрастающих концентрациях
в течение 30 мин при 37оС


Слайд 13Влияние препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто» на опосредованную рецептором хемотаксического пептида

продукцию АФК изолированными гранулоцитами крови человека


Препарат ТГ-орто
дозозависимо подавляет развитие
респираторного взрыва в изолированных
гранулоцитах.

Клетки были инкубированы с
ТГ-орто в различных разведениях
при 37оС в течение 30 мин,
затем активированы 1 мкМ N-формил-Met-Leu-Phe,
чтобы вызвать респираторный взрыв.


Слайд 14Клетки были инкубированы с
ТГ-орто в различных разведениях
при 37оС в

течение 30 мин,
затем активированы 50 мкМ N-формил-Met-Leu-Phe, чтобы вызвать респираторный взрыв.

Влияние препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто» на опосредованную рецептором хемотаксического пептида продукцию АФК изолированными гранулоцитами крови человека

Препарат ТГ-орто
дозозависимо изменяет способность гранулоцитов продуцировать активные формы кислорода
.


Слайд 15PDK
Участники передачи сигнала от рецептора fMLF
Рецептор fMLF
Gi
Shc
Grb2
SOS
GAP
ras
raf
MAPK
каскад
PI3K
PKB/Akt
PI3P
PLC
Ca2+
DAG
PKC
PA
PLD
PA-AK
Кальмодулин
Ca2+-CK


Слайд 16Сигнальные пути, активируемые окислительным стрессом
HSF1
C-Jun
NF-kB
STAT
PLCγ1
PKC
PI3K
PKB
JAK
ERK
JNK
p38
Gene expression
changes
p53

Активные
Формы
Кислорода


(on J.L. Martindale &

N.J. Holbrook, 2002, J.Cell.Physiol.)

DNA-PK


Слайд 17Оценка антиоксидантной активности препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ - орто» на модели супероксид-анион

продуцирующей ферментативной реакции

Препарат «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ - орто»
дозозависимо ингибирует
генерацию АФК в
ферментативной
бесклеточной реакции
«ксантин – ксантиноксидаза».

В реакции «ксантин – ксантиноксидаза»
продуцируется супероксид-анион радикал

Препарат


Слайд 18Выводы:
Антиоксидантная активность препарата «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто» проявляется в цельной крови,

на изолированных клетках и в ферментативной реакции.
Препарат «ТИГРОВЫЙ ГЛАЗ – орто» обладает высокой антиоксидантной активностью в дозах, достигаемых при его разведении более чем в 100000 раз.
Антиоксидантное действие исследуемого препарата направлено на супероксид-анион радикал, который является исходной формой активных интермедиатов кислорода.


Предполагается, что применение препарата может быть полезным при заболеваниях, сопровождающихся дисфункцией фагоцитов, связанной с избыточной нерегулируемой продукцией АФК.

Слайд 19Работа выполнена совместно с сотрудниками
Лаборатории клеточной нейробиологии
Института Биофизики клетки
Российской Академии

Наук
г. Пущино


Благодарности

Сафронова В.Г.
Мальцева В.Н.
Кротова Л.М.
Санталов Б.Ф.



Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика