- Главная
- Разное
- Дизайн
- Бизнес и предпринимательство
- Аналитика
- Образование
- Развлечения
- Красота и здоровье
- Финансы
- Государство
- Путешествия
- Спорт
- Недвижимость
- Армия
- Графика
- Культурология
- Еда и кулинария
- Лингвистика
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Маркетинг
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Сeквенирование нуклеиновых кислот презентация
Содержание
- 1. Сeквенирование нуклеиновых кислот
- 2. Метод блуждающего пятна или «Сенгерпринт» Пометить олигонуклеотид
- 3. Электрофорез на ацетате целлюлозы
- 4. Гомохроматография на DEAE-целлюлозе
- 5. рК оснований 6.4 1.0 9.5 (N-3)
- 6. Протонирование оснований при рН 3,5
- 7. Общий заряд олигонуклеотида рGATCTTCAGTA и его фрагментов
- 8. Определение последовательности нуклеиновых кислот методом Максама
- 9. Отщепление пуриновых оснований под действием 60% HCOOH
- 10. Отщепление гуанина под действием Me2SO4
- 11. Отщепление тимина под действием гидразина
- 12. Отщепление цитозина под действием гидразина в присутствии 2М NaCl
- 13. Общая схема проведения секвенирования по Максаму -
- 14. 5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’ 3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA
- 15. G A+G T+C C *pGATCGCTATACGA *pGATCGCTATAC *pGATC
- 16. G G+A T+C C GAGCATATCGCTAG 3’- 5’-
Слайд 2Метод блуждающего пятна или «Сенгерпринт»
Пометить олигонуклеотид по 5’- или 3’- концу.
Частичный
Электрофорез на ацетате целлюлозы при рН 3,5
Гомохроматографию на DEAE-целлюлозе.
Радиоавтография полученной хроматограммы
Расшифровка результатов
Слайд 4
Гомохроматография на DEAE-целлюлозе
-A
-T
-G
-A
-C
-T
-T
-C
-T
-A
p*NATCTTCAGTA
-C
-A
-G
-T
Частичный гидролизат tРНК
Слайд 5рК оснований
6.4
1.0
9.5 (N-3)
5’-UMP
6.3
0.8
4.5 (N-3)
5’-CMP
6.1
0.7
9.4 (N-1)
2.4 (N-7)
5’-GMP
6.1
0.9
3.8 (N-1)
5’-AMP
рК2 фосфата
pK1 фосфата
рКа оснований-N
Нуклеотиды
Слайд 8Определение последовательности нуклеиновых кислот методом
Максама - Гилберта
Пометить фрагмент ДНК (РНК)
Провести 4 химические реакции для отщепления оснований от цепи НК
Расщепить сахарофосфатный остов в местах где отсутствуют основания
Гель-электрофорез в ПААГ
Радиоавтография
Расшифровка результатов
Слайд 13Общая схема проведения секвенирования по Максаму - Гилберту
Т4-полинуклеотидкиназа, γ-АТФ
Рестриктаза EcoR I
Разделение
5’ – GATCGCTATACGAGAATTCAGCTCGA - 3’
3’ – CTAGCGATATGCTCTTAAGTCGAGCT - 5’
5’-*pGATCGCTATACGAGAATTCAGCTCGA - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAAGTCGAGCTp*-5’
5’-*pGATCGCTATACGAG AATTCAGCTCGA - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA GTCGAGCTp*-5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’- AATTCAGCTCGA - 3’
3’ - GTCGAGCTp*-5’
5’-*pGATCGCTATACGAGAATTCAGCTCGA - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAAGTCGAGCTp*-5’
Слайд 145’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
Me2SO4
H+
NH2-NH2
NH2-NH2 +NaCl
Химическая модификация
по Максаму-Гилберту
5’-*pGATCGCTATACGAG
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTA A -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
3’ - CTAGCGATATGCTCTTAA -5’
Слайд 15G
A+G
T+C
C
*pGATCGCTATACGA
*pGATCGCTATAC
*pGATC
*p
*pGATCGCTATACGA
*pGATCGCTATACG
*pGATCGCTATAC
*pGATCGCTAT
*pGATCGCT
*pGATC
*pG
*p
*pGATCGCTATA
*pGATCGCTA
*pGATCGC
*pGATCG
*pGAT
*pGA
*pGATCGCTATA
*pGATCG
*pGAT
5’-*pGATCGCTATACGAG - 3’
