- Главная
- Разное
- Дизайн
- Бизнес и предпринимательство
- Аналитика
- Образование
- Развлечения
- Красота и здоровье
- Финансы
- Государство
- Путешествия
- Спорт
- Недвижимость
- Армия
- Графика
- Культурология
- Еда и кулинария
- Лингвистика
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Маркетинг
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Определение антибиотико-чувствительности микроорганизмов презентация
Содержание
- 1. Определение антибиотико-чувствительности микроорганизмов
- 2. Определение антибиотикочувствительности микроорганизмов методы Диско- диффузионный
- 3. Диско-диффузионный метод Для микроорганизмов со сложными питательными
- 4. Диско-диффузионный метод Приготовление чашек Чашки подсушивают, на дне чашки отмечают места наложения дисков
- 5. Диско-диффузионный метод Приготовление инокулята Инокулят готовят из
- 6. Диско-диффузионный метод Приготовление инокулята Исследуемую
- 7. Диско-диффузионный метод Приготовление инокулята Суспензию разводят
- 8. Диско-диффузионный метод Нанесение суспензии на поверхность
- 9. Диско-диффузионный метод Нанесение суспензии на поверхность
- 10. Диско-диффузионный метод Нанесение суспензии на поверхность
- 11. Диско-диффузионный метод Нанесение суспензии на поверхность
- 12. Диско-диффузионный метод Наложение дисков Перед использованием флаконы
- 13. Диско-диффузионный метод Чашки ставят
- 14. Диско-диффузионный метод Чашки помещают кверху
- 15. Диско-диффузионный метод С помощью линейки
- 16. Диско-диффузионный метод При не резко очерченном
- 17. Диско-диффузионный метод Пример: Гентамицин – зона задержки
- 18. Диско-диффузионный метод Для контроля воспроизводимости и точности
- 19. Приготовление раствора антибиотика Основной раствор (готовится на
- 20. Серийное разведение антибиотика
- 21. Подготовка суспензии микроорганизмов 18-20 часовая
- 22. Внесение суспензии в пробирки с разведениями
- 23. Учет результата
- 24. Е-тест Зона роста культуры Эллипсовид- ная
- 25. Е-тест
Слайд 2Определение антибиотикочувствительности микроорганизмов
методы
Диско-
диффузионный
метод
Е-тест
Метод серийных
разведений
В жидкой
питательной
среде
В плотной
питательной
среде
Слайд 3Диско-диффузионный метод
Для микроорганизмов со сложными питательными
потребностями в среду вносят ростовые
добавки:
кровь,
сыворотка крови.
Добавление глюкозы недопустимо.
кровь,
сыворотка крови.
Добавление глюкозы недопустимо.
Питательные среды:
АГВ
Среда Мюллера Хинтона
Слайд 4Диско-диффузионный метод
Приготовление чашек
Чашки подсушивают,
на дне чашки
отмечают места
наложения дисков
Слайд 5Диско-диффузионный метод
Приготовление инокулята
Инокулят готовят из
чистой 18-20-часовой
культуры бактерий,
выросшей на
поверхности плотной
питательной среды
Слайд 6Диско-диффузионный метод
Приготовление инокулята
Исследуемую
культуру
смывают
стерильным
изотоническим
раствором
хлорида натрия
Слайд 7Диско-диффузионный метод
Приготовление инокулята
Суспензию разводят
стерильным
изотоническим раствором
хлорида натрия
до мутности оптического
стандарта
ГИСК им.
Л. А. Тарасевича
на 10 ед.
на 10 ед.
Слайд 8Диско-диффузионный метод
Нанесение суспензии на поверхность
агаровой среды
Инокулят в объеме
1 мл
наносят на
поверхность
агаровой среды
поверхность
агаровой среды
Слайд 9Диско-диффузионный метод
Нанесение суспензии на поверхность
агаровой среды
Инокулят равномерно
распределяют по
поверхности шпателем
или
путем
покачивания чашки
покачивания чашки
Слайд 10Диско-диффузионный метод
Нанесение суспензии на поверхность
агаровой среды
Чашку наклоняют
и дают остатку
суспензии стечь
на одну сторону
Слайд 11Диско-диффузионный метод
Нанесение суспензии на поверхность
агаровой среды
Избыток суспензии
удаляют пастеровской
пипеткой.
Чашки
выдерживают при
комнатной температуре
10-15 мин. для полного
впитывания суспензии.
Перед наложением
дисков поверхность
среды должна быть
сухой.
выдерживают при
комнатной температуре
10-15 мин. для полного
впитывания суспензии.
Перед наложением
дисков поверхность
среды должна быть
сухой.
Слайд 12Диско-диффузионный метод
Наложение дисков
Перед использованием флаконы
с дисками необходимо выдержать
при комнатной
температуре
в течение 1 часа для
предотвращения образования
конденсата на внутренней
стенке флакона.
Диски с помощью пинцета
накладывают на поверхность
агара на одинаковом
расстоянии один от другого
и примерно на расстоянии
2 см от края чашки.
На одну чашку следует
помещать не более 6 дисков.
в течение 1 часа для
предотвращения образования
конденсата на внутренней
стенке флакона.
Диски с помощью пинцета
накладывают на поверхность
агара на одинаковом
расстоянии один от другого
и примерно на расстоянии
2 см от края чашки.
На одну чашку следует
помещать не более 6 дисков.
Слайд 13Диско-диффузионный метод
Чашки ставят в термостат сразу после наложения дисков
и инкубируют в течение 18-20 часов при 37 ºС, перевернутыми кверху дном.
Инкубация чашек
Слайд 14Диско-диффузионный метод
Чашки помещают кверху дном на темную матовую поверхность
так, чтобы свет падал под углом 45º (учет в отраженном свете).
Учет результатов
Слайд 15Диско-диффузионный метод
С помощью линейки или измерителя измеряют диаметр зон
задержки роста вокруг дисков, включая диаметр самих дисков, с точностью до 1 мм.
Учет результатов
Слайд 16Диско-диффузионный метод
При не резко очерченном крае зоны или зоне с
двойным контуром следует измерить диаметр зоны по наиболее четкому контуру
Учет результатов
Слайд 17Диско-диффузионный метод
Пример:
Гентамицин – зона задержки роста 13 мм;
Левомицетин – зона задержки
роста 17 мм;
Ципрофлоксацин – зона задержки роста 23 мм.
Ципрофлоксацин – зона задержки роста 23 мм.
Интерпретация полученных результатов
Слайд 18Диско-диффузионный метод
Для контроля воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности необходимо при
каждой постановке теста параллельно с испытуемыми штаммами использовать эталонные штаммы E. coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa.
Диаметры зон задержки роста эталонных штаммов должны соответствовать табличным значениями.
Эталонные штаммы могут быть использованы для проверки качества среды, дисков и правильности методики постановки теста.
Диаметры зон задержки роста эталонных штаммов должны соответствовать табличным значениями.
Эталонные штаммы могут быть использованы для проверки качества среды, дисков и правильности методики постановки теста.
Контроль воспроизводимости
и точности полученных результатов
Слайд 19Приготовление раствора антибиотика
Основной раствор
(готовится на
растворителе)
1000 мкг (ЕД) в 1 мл
Рабочий
раствор
(готовится на
питательной среде)
(готовится на
питательной среде)
1 мл
1 мл
1 мл
Основной
раствор
1000
мкг/мл
1:10
1:100
1:1000
100
мкг/мл
10
мкг/мл
1
мкг/мл
Первая пробирка ряда
Слайд 20Серийное разведение антибиотика
100 мкг/мл
50
25
12
6
3
1,5
0,7
2 мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
100 мкг/мл
10 мкг/мл
2 мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
5
2,5
1,2
0,6
0,3
0,15
0,07
1 мкг/мл
2мл
2 мл
0,5
0,25
1,2
0,12
0,06
0,03
0,015
0,007
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
2мл
Слайд 21Подготовка суспензии микроорганизмов
18-20 часовая
чистая культура
исследуемого
микроорганизма
Суспензия с концентрацией
микроорганизмов
109
(10 ЕД оптического
стандарта мутности)
стандарта мутности)
0,1 мл
10 мл
МПБ
1 мл
9 мл
МПБ
Разведение
1:100
107
Разведение
1:1000
106
Слайд 22Внесение суспензии в пробирки с разведениями
106
в 1 мл – 1000 000
микроб. клеток
в 0,1 мл – 100 000 микроб. клеток
в 0,1 мл – 100 000 микроб. клеток
по 0,2 мл
контроль
Контроль чистоты
культуры
Слайд 23Учет результата
МПК
Рост
микроорганизмов
Нет роста
10
мкг/мл
5
мкг/мл
2,5
мкг/мл
1,2
мкг/мл
0,3
мкг/мл
0,6
мкг/мл
0,15
мкг/мл
0,07
мкг/мл
