Слайд 1Обсуждение результатов рецензирования заключений экспертов ЭКП органов внутренних дел России, представленных
для решения вопроса о выдаче свидетельства на право производства биологической экспертизы по исследованию ДНК
Экспертно-криминалистический
центр МВД России
Алексей Юрьевич Культин, главный эксперт
отдела экспертиз биологических объектов
управления экспертиз биологических объектов и учетов
ЭКЦ МВД России
«Совершенствование практики
производства генетических экспертиз»
г. Уфа 06-10 сентября 2010 г.
Слайд 2Количество кандидатов на право производства экспертизы по исследованию ДНК
Слайд 3Результаты рецензирования по годам (%)
Слайд 4Замечания к Заключениям эксперта
Описание объектов исследования, установление наличия и вида биологических
следов;
Выделение ДНК;
Оценка качества и количества выделенной ДНК;
Проведение типирования локусов ДНК;
Интерпретация электрофореграмм;
Вероятностно-статистическая обработка результатов;
Формулирование выводов;
Исполнение исследования.
Слайд 5Описание объектов исследования, установление наличия биологических следов
Отсутствует описание объектов исследования –
ссылка на первичное заключение
– недопустимо, т.к. после первичного исследования объекты изменены;
Объекты исключаются из числа исследуемых в результате отрицательного теста PSA
– недопустимо, т.к. сперма может быть выявлена цитологическим методом, а PSA может быть разрушен
Слайд 6Установление наличия биологических следов
Цитология?...
RT-PCR –
позволяет установить наличие мужской ДНК
Слайд 7Выделение ДНК
Неудачное исследование при выделении ДНК с помощью ионообменной смолы Chelex
100:
непригодные объекты (трупная, зафиксированная, гемолизированная кровь);
отсутствие концентрирования ДНК;
не проведено повторное выделение ДНК с помощью других методов (фенол-хлороформ, DNA IQ System).
Не проводится дифференциальный лизис клеток
Слайд 8Проводится с помощью электрофореза в агарозном геле. По результатам оценки некоторые
объекты исключаются из исследования
– это недопустимо.
Проводится с помощью ABI PRISM 7000 (7500) SDS, но результаты не приводятся или они никак не оцениваются;
Оценка качества
и количества выделенной ДНК
Слайд 9Проводится с помощью ABI PRISM 7000 (7500) SDS. Из исследования исключаются
объекты с концентрацией более 0,05 нг/мкл, хотя допустима и более низкая концентрация;
Согласно данным о чувствительности набора реагентов «AmpFlSTR Identifiler» (см. AmpFlSTR Identifiler PCR Amplification Kit User’s Manual: 2005, Applied Biosystems) для проведения успешного типирования локусов ядерной ДНК концентрация ДНК должна быть не менее
0,0125 нг/мкл.
Оценка качества
и количества выделенной ДНК
Слайд 10Проведение типирования локусов ДНК
Применяется один набор реагентов (например, PowerPlex 1.2).
Выявлен частичный
профиль.
В результате информации недостаточно для формулирования категорического вывода. Формулирование выводов в вероятной форме снижает ценность проведенной экспертизы как доказательства.
Цель – получить категорический вывод.
Следует проводить дополнительные исследования (например AmpFlSTR MiniFiler).
Слайд 11Проведение типирования локусов ДНК
В качестве положительного контроля используется проба K562 вместо
пробы 9947А и наоборот.
В результате в таблице экспертизы указан один генотип, а на электрофореграмме выявлен другой!
– экспертная ошибка!
Слайд 12Интерпретация электрофореграмм
Не утверждается внутренний стандарт
– вероятность не установления аллелей или
неверного установления аллелей
Слайд 14Интерпретация электрофореграмм
Принятие неспецифических фрагментов за истинные аллели
- экспертная ошибка
Слайд 15Интерпретация электрофореграмм
Смещение фрагментов ДНК относительно биновой сетки
- высокий риск экспертной ошибки
Слайд 16Интерпретация электрофореграмм
Интерпретация электрофореграмм ДНК, загрязненной посторонней ДНК (при исследовании костных объектов)
– экспертная ошибка
Интерпретация электрофореграмм с низким уровнем сигнала (особенно смешанных следов)
– высокий риск экспертной ошибки.
Слайд 17Вероятностно-статистическая обработка результатов
Не используются частоты встречаемости аллелей среди жителей России
М.Г. Пименов,
С.А. Кондрашов, И.В. Стороженко и др. Исследование частот встречаемости аллелей STR-локусов среди жителей России Информационное письмо М.: ЭКЦ МВД России, 2004.
Слайд 18Вероятностно-статистическая обработка результатов
При расчете вероятности случайного совпадения генетических признаков используются генотипы
не биологического следа или подозреваемого, а генотип потерпевшей.
Слайд 19Вероятностно-статистическая обработка результатов
Оценка «смешанных» следов:
вообще не проводится, вероятный вывод;
применяются неверные формулы.
И.О.
Перепечина, С.А. Гришечкин Экспертная оценка и математическая обработка результатов исследования объектов, содержащих ДНК двух и более лиц Методические рекомендации М.: ЭКЦ МВД России, 1997.
М.Г. Пименов, А.Ю. Культин, С.А. Кондрашов Научные и практические аспекты криминалистического ДНК-анализа Учебное пособие. – М: ГУ ЭКЦ МВД России, 2001.
Слайд 20Вероятностно-статистическая обработка результатов
Например:
необходимо определить вероятность случайного совпадения генетических признаков, выявленных в
исследуемых объектах и образцах крови лица 1 и лица 2. При расчетах определяется вероятность случайного совпадения генетических признаков, выявленных в исследуемых объектах и образце крови лица 1 при условии, что в смешанном объекте априорно присутствует генетический материал лица 2
– экспертная ошибка
Слайд 21Вероятностно-статистическая обработка результатов
Например:
рассматривается объект – подногтевое содержимое потерпевшей А., который априорно
содержит генетический материал А. Для корректного расчета необходимо исследование образца крови А. Эксперт рассматривает полученный «смешанный» объект как смесь биологического материала подозреваемого С. и неизвестного лица, что неверно.
– экспертная ошибка
Слайд 22Вероятностно-статистическая обработка результатов
Оценка родства (родитель-ребенок):
при проведении расчетов вероятности случайного совпадения генетических
признаков, выявленных в ДНК ребенка и предполагаемой матери, оценивают событие, заключающееся в том, что предполагаемая мать не является биологической матерью, а ее генетические признаки случайно совпадают с вероятными материнскими аллелями, выявленными в ДНК ребенка. Данная вероятность будет соответствовать вероятности встречаемости в популяции лица, у которого в генотипе имеется первый или второй аллель ребенка. При расчетах использованы аллели предполагаемой матери
– это неверно.
Слайд 23Вероятностно-статистическая обработка результатов
Оценка родства (отцовства):
проводится расчет не вероятности случайного совпадения генетических
признаков предполагаемого отца и ребенка при условии бесспорного материнства известной матери, а расчет вероятности случайного совпадения генетических признаков ребенка и родительской пары
– необоснованно занижено значение вероятности случайного совпадения.
Слайд 24Вероятностно-статистическая обработка результатов
Оценка родства при учете локуса HPRTB:
Для отцовства и материнства
расчеты различны!
Локус HPRTB локализован на X-хромосоме;
В случае отцовства формулы:
Ребенок
Отец
a
b
P = pa
Мать
P = pa + pb
Оценка родства при учете локуса HPRTB:
Для отцовства и материнства расчеты различны!
Локус HPRTB локализован на X-хромосоме;
В случае материнства формулы:
P = pa(2 – pa)
P = pa(2 – pa) + pb(2 – pb) – 2papb
Слайд 25Формулирование выводов
Вероятный отрицательный вывод:
Кровь не могла произойти от … – неверно;
Кровь
не произошла от … – верно
Слайд 26Формулирование выводов
«Полученная величина означает, что выявленным сочетанием генетических признаков теоретически обладает
в среднем один из 48309 человек. Таким образом труп неизвестной женщины … является биологической дочерью … с вероятностью 1 из 48309 человек».
На самом деле полученное значение вероятности означает, что одна женщина из полученного числа обладает генетическими признаками, не исключающими ее материнства в отношении неизвестной женщины, костные останки которой представлены на исследование. Применение использованных формулировок может ввести в заблуждение следствие или суд.
Слайд 27Формулирование выводов
«… смесь спермы … могла произойти от … и еще
нескольких лиц с вероятностью 1 на 55,6 миллионов человек»; «Вероятность происхождения спермы в смеси от … составляет 1:55,6×107».
На самом деле эксперт проводит расчеты величины вероятности случайного совпадения генетических признаков, при этом определяется значение, как часто в популяции встречается лицо с генотипом, не исключающим происхождение от него спермы. Следовало использовать следующую формулировку
«Вероятность случайного совпадения генетических признаков, выявленных сперме (объект №1) и в крови … составляет 1,8 ×108. Это означает, что один из 55,6 миллионов человек обладает генетическими признаками , не исключающими происхождение от него спермы (объект №1)».
Применение же использованных формулировок ошибочно и может ввести в заблуждение следствие или суд.
Слайд 28Исполнение исследования
Среди исследуемых объектов имеется «препарат ДНК, выделенной из объекта №1,
оставшийся от предыдущего исследования и хранящийся в лаборатории».
Вызывает сомнение процессуальная допустимость такого объекта. Согласно статье 16 Федерального закона N 73-ФЗ «О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации» «Эксперт не вправе: … самостоятельно собирать материалы для производства судебной экспертизы».
Препарат ДНК не был представлен на экспертизу, а хранился в лаборатории, т.е. норма закона нарушена. Для осуществления хранения ДНК объекта в лаборатории следователем должно было быть дано соответствующее поручение. В имеющихся материалах об этом не упоминается. Таким образом, допустимость исследования ДНК объекта может быть поставлена под сомнение, а заключение эксперта не принято в качестве доказательства.
– такое проведение исследований недопустимо.
Слайд 29Исполнение исследования
Исходный объект – пятно крови 1,0 × 2,0 см;
Наличие
и вид крови – «Seratec HemDirect Hemoglobin Assay» – результат положительный;
Выделение ДНК – Chelex 100;
Оценка качества и количества – Real Time – результат положительный (>3 нг/мкл);
Исследование ДНК неудачно – результат отрицательный (единичные локусы).
– недопустимо, неудачная нормализация концентрации ДНК!
Слайд 30Интересные электрофореграммы
Трисомия D18S51
Трисомия D21S11
Аллель 13 локуса D2S1338
Аллель 13 локуса D2S1338
Аллель 19.2
локуса D19S433
Слайд 32
Экспертно-криминалистический
центр МВД России
Алексей Юрьевич Культин
Тел.: (499) 745-80-51
E-mail: dnamail@rambler.ru