Валидация методик теста Растворение презентация

теста «Растворение»

Докладчик: к.ф.н. Шохин Игорь Евгеньевич
руководитель лаборатории фармакокинетики
ООО «Технология лекарств»

Harmonized Tripartite Guidelines. ICH Q2A «Text on Validation of Analytical Procedures». – ICH, Geneva, 1995
ICH Harmonized Tripartite Guidelines. ICH Q2B «Validation of Analytical Procedures: Methodology». – ICH, Geneva, 1997
Guidance for Industry: Analytical procedures and method validation (draft). U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER). U.S. Government Printing Office: Washington, DC, 2000

33 – NF 28. Monograph 1092 “The Dissolution Procedure: Development and Validation
Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств (методические рекомендации). Под ред. Юргеля Н.В., Младенцева А.Л. Разработано АРФП. – 2007.

Необходимо разработать СОП предприятия на основе указанных документов!

методик для производителей лекарств. Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств, подготовленное Федеральным Союзом Фармпроизводителей Германии (BAH). Пер. Аладышевой Ж.И. и Спицкого О.Р. Под ред. Береговых В.В. – М., Литерра, 2008. – 70 с.
И.Е. Шохин, Г.В. Раменская, К.С. Давыдова. Современные подходы к валидации методик испытания «Растворение» // Химико-фармацевтический журнал. – Москва, 2011. – т. 45. – №3. – С. 92-95.

Questions and Answers. Edited by M. Marques, W. Brown. Diss. Tech: Hockesin, DE, USA. – 2010.
R. Hanson, V. Gray. Handbook on Dissolution Testing. 3rd edition. Diss. Tech: Hockesin, DE, USA. – 2004.
Публикации в журнале Dissolution Technologies.

«Растворение»

Специфичность
Линейность
Правильность
Прецизионность (сходимость и промежуточная прецизионность либо воспроизводимость)
Аналитический диапазон
Робастность (устойчивость)
Стабильность растворов
Валидация процедуры фильтрации
При необходимости – валидация автоматического отбора проб

это способность методики безусловно определять действующее вещество в присутствии компонентов, которые могут содержаться в пробе

Проводят тест «Растворение» для исследуемого ЛС и смеси плацебо-компонентов или ЛФ-плацебо
Эффект влияния плацебо рассчитывают по формуле:
100 С * (Арl/Аst)*(V/L)
Критерий приемлемости – не более 2 %

не накладывается на пик ЛВ

ЛС специфичность желательно определять на плацебо-ЛФ, а не на смеси плацебо-компомнентов
При эффекте влияния плацебо более 2 % следует: (1) изменить длину волны, (2) проводить измерения при 2-х длинах волн с соответствующей поправкой, (3) заменить УФ-спектрофотометрию на ВЭЖХ
При наличии в составе ЛФ других ЛВ и/или продуктов их распада необходимо показать отсутствие их влияния на специфичность

это способность методики (в пределах определенного диапазона) получать результаты, прямо пропорциональные концентрации (количеству) действующего вещества в пробе

Линейность методик теста «Растворение» допустимо определять в мерных колбах
Для малорастворимых ЛВ – содержание орг. р-ля не более 5 %
Диапазон концентраций должен покрывать ± 20 % от верхней и нижней границы нормы теста «Растворение»
Не менее 6 уровней концентраций, желательно 9 (АРФП, 2007)

немедленного высвобождения при норме не менее 75 % за 45 мин: 55 %, 65 %, 75 %, 85 %, 95 %, 105 %, 115 %, 125 % и 135 % (шаг 10 %)
Для пролонгированных ЛВ при норме не более 25 % в течение 2 ч и не менее 85 % в течение 12 ч: диапазон 5 % - 95 %
Устанавливаются требования к: (1) свободному члену линейной зависимости, а, (2) коэффициенту корреляции, r, (3) остаточному стандартному отклонению, S0 (АРФП, 2007)
Формулы расчета приведены в Руководстве АРФП
USP: r2 не менее 0,98; отрезок по оси y незначительно отличается от нуля

для ЛФ немедленного высвобождения (9 концентраций в диапазоне 55 % - 155 %)

нормализо-ванных координатах (введено-найдено)
Уравнение линейной зависимости: y = 1,0207 x - 1,0136
Коэффициент корреляции: 0,99980

это степень близости между известным истинным значением или справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Характеризуется величиной относительной погрешности

Проводят тест «Растворение» для смеси плацебо-компонентов или ЛФ-плацебо с прибавлением стандартного раствора
Не менее 3 концентраций в диапазоне ± 20 % от верхней и нижней границы нормы теста «Растворение»
Не менее 3 измерений для каждой концентрации
Для кишечнорастворимых ЛС: валидация кислотной стадии по норме не более 10 %

ЛВ – содержание орг. р-ля не более 5 % для первого разведения
Критерий приемлемости по USP: открываемость (введено-найдено) должна составлять 95 – 105 %
Критерий приемлемости по АРФП: оценивают по критериям статистической и практической незначимости

это степень близости (степень дисперсии) между сериями измерений, полученных при параллельных измерениях однородного образца в установленных условиях. Характеризуется величиной относительного стандартного отклонения.

Проводят тест «Растворение» для смеси плацебо-компонентов или ЛФ-плацебо с прибавлением стандартного раствора либо определяют в мерных колбах на стандартных растворах
Либо 3 концентрации в диапазоне ± 20 % от верхней и нижней границы нормы теста «Растворение» при не менее 3 измерений
Либо 1 концентрация в середине линейного диапазона при не менее 6 измерений

нескольких уровнях – повторяемость/сходимость (repetability), промежуточная прецизионность (intermediate precision) и воспроизводимость (reproducibility)
При определении воспроизводимости методики испытания «Растворение» необходимость в определении промежуточной прецизионности отсутствует
Критерий приемлемости по относительному стандартному отклонению (RSD, %): не более 2 %
Критерий приемлемости по АРФП, 2007: Односторонний доверительный интервал ΔZ не должен превышать мак-симально допустимую неопределенность результатов анализа (ΔAs)

прецизионности: другой день, другой аналитик, другое оборудование
Допустимо определение промежуточной прецизионности при проведении теста «Растворение» на хорошо охарактеризованной серии ЛС с узкими границами однородности дозирования, а не на стандартных растворах + плацебо-смеси
Не менее 6 единиц ЛФ, желательно 12 (в каждый из дней)
Критерии приемлемости по USP: при норме высвобождения не более 85 % и ниже – различия в результатах теста не более 10 %, при норме более 85 % - не более 5 %
Критерий приемлемости по АРФП: Δintra = t (95%, m*n-1)* RSDintra% не должна превышать ΔAs

диапазон – это интервал между верхним и нижним значением концентрации (количества) анализируемого компонента в пробе (включая и эти значения), в рамках которого доказана приемлемая правильность, прецизионность и линейность методики

По Руководству АРФП допустимо одновременное определение правильности, прецизионности и линейность методики на 9 растворах

(robustness) – это измерение способности аналитической методики оставаться неизменной при небольших, намеренных изменениях условий испытания и показывает надежность методики при обычном использовании

Определяют в 3 – 6 повторностях, в зависимости от результатов определения промежуточной прецизионности
Параметры: изменение объема и состава среды растворения (рН, буферной емкости, концентрации поверхностно-активных веществ), число оборотов мешалки, температура, метод деаэрации среды…

ВЭЖХ: колонка (одного типа), состав подвижной фазы (доля органического компонента, доля буферного раствора, рН), градиент элюирования, скорость потока подвижной фазы, температура колонки, длина волны УФ-детектирования…
Для УФ-спектрофотометрии: длина волны
Следует валидировать именно критические параметры

для испытуемого и стандартного растворов
Для испытуемого раствора: срок годности при комнатной температуре
Для стандартного раствора: при комнатной температуре и при хранении в холодильники при температуре 2 оС- 8 оС
Стабильность стандартного раствора определяют относительно свежеприготовленного стандартного раствора, испытуемой пробы – относительно первоначальных данных количественного определения той же пробы
Норма 98 – 102 %

фильтрах – один из наиболее важных критических параметров, наряду с процедурной дегазации
Проводят на стандартном и испытуемом растворе
Раствор фильтруют не менее 3 раз
Для стандартного раствора сравнивают результаты КО фильтрованного и нефильтрованного растворов
Для испытуемого раствора сравнивают результаты КО фильтрованного и центрифугированного растворов
Норма 98 – 102 %

проб

Источник вариабельности – сорбция на каналах, в пробоотборнике и т.д.
Проводят тест «Растворение» для смеси плацебо-компонентов или ЛФ-плацебо с прибавлением стандартного раствора, либо на хорошо охарактеризованной серии ЛС с узкими диапазоном однородности дозирования, с автоматическим и ручным отбором проб
Норма 98 – 102 %

обеспечения

Согласно 21 CFR Part 11, U.S. FDA
Автоматические таблицы Excel для обработки результатов
Программное обеспечение автоматизированных систем для теста «Растворение»
Программное обеспечение средств измерения: УФ-спектрофотометр, ВЭЖХ…

внимание!