Современные методы диагностики в клинической микробиологии презентация

Содержание

Микроскопический Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) Серологический Аллергологический Биологический Молекулярно-генетические Масс-спектрометрия Методы микробиологической диагностики

Слайд 1ФГБОУ ВО Самарский государственный медицинский университет Минздрава РФ Кафедра общей и клинической

микробиологии, иммунологии и аллергологии

Современные методы диагностики в клинической микробиологии

Доцент, к.м.н. Кондратенко Ольга Владимировна


Слайд 2Микроскопический
Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический)
Серологический
Аллергологический
Биологический

Молекулярно-генетические

Масс-спектрометрия

Методы микробиологической диагностики


Слайд 3Микроскопический
Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический)
Биологический
Серологический
Аллергологический
Молекулярно-генетические

Масс-спектрометрия!

Методы микробиологической диагностики


Слайд 4Классическая микробиология
Вирусология
Иммунология
Серологические методы и реакции
ПЦР
Объединение микробиологических лабораторий с КДЛ
Возрождение классической микробиологии
«Судьба»

микробиологии в России в XX веке

Слайд 5Контроль с помощью вакцинопрофилактики
Контроль с помощью совершенствования противоэпидемических мероприятий
Своевременная разработка и

внедрение в практику методических рекомендаций по микробиологической диагностике

Облигатные возбудители инфекционных заболеваний


Слайд 6Ежегодное более чем у 100 видов микроорганизмов обнаруживают патогенетические факторы –

значение в качестве условных патогенов
Регулярные пересмотры классификаций микроорганизмов с изменением таксономического положения и наименований
Внедрение в практику принципиально новых методов исследования

Факультативные (условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний


Слайд 7Отсутствие новых методических рекомендаций по работе с клиническим материалом

Действующий Приказ N

535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» от 22 апреля 1985 г.
 

Факультативные (условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний


Слайд 8«Этиологическая структура возбудителей инфекционных процессов в последнее десятилетие изменилась: значительно

увеличился удельный вес заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами (около 200 видов условно-патогенных микроорганизмов). Возрастает роль неспорообразующих анаэробов и некоторых других видов микроорганизмов, роль которых в инфекционной патологии ранее была неизвестна»

Приказ N 535 от 22 апреля 1985 г


Слайд 9750 –> 4600 видов микроорганизмов с потенциальным значением в патологии человека
Факультативные

(условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний

Слайд 10МУ 4.2.2039-05. 4.2.
Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы.
Техника сбора

и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории.
Методические указания

Дата введения: 01.07.2006

Забор и транспортировка материала


Слайд 11Микроскопический метод исследования
Автоматические покрасочные станции


Слайд 12Цель – идентификация микроорганизмов до определенным таксономических единиц по морфологическим и

тинкториальным свойствам

Основные задачи:
Определить морфологию микроорганизмов
Определить цвет, в который окрашиваются определенные структуры клетки микроорганизмов
Определить наличие или отсутствие микроорганизма в исследуемом материале

Микроскопический метод исследования


Слайд 13
Дополнительные задачи:
Определить качество поступившего в лабораторию материала
Определить наиболее возможного возбудителя патологического

процесса в клиническом материале
Выявить взаимоотношения микроорганизмов с клетками организма-хозяина
По определенным признакам взаимоотношений микроорганизмов с клетками организма-хозяина клиницист может поставить предварительный или окончательный диагноз


Микроскопический метод исследования


Слайд 14Простые методы
Щелочной синькой
Фуксином

Сложные методы
По Граму
По Цилю-Нильсену
По Бурри-Гинсу
По Леффлеру (Нейссеру)
Наиболее распространенные способы

окрасок клинического материала для определения микрофлоры

Слайд 15Использование люминесцентных красителей
Аурамин ОО, Родамин С – микобактерии
Калькофлюор белый - грибы
«Новые»

способы окрасок клинического материала для определения микрофлоры

Слайд 16Люминесцентные красители (аурамин ОО, родамин С и др.) связываются с воскоподобными

структурами микробной клетки. При облучении окрашенных клеток возбуждающим светом они начинают светиться оранжевым или ярко-желтым светом на черном или темно-зеленом фоне.
За счет свечения вокруг клетки образуется ореол, благодаря которому видимые размеры светящейся клетки превышают ее физические размеры.

Люминесцентные красители для выявления микобактерий


Слайд 17В связи с этим окрашенные флюорохромными красителями препараты обычно исследуются при

увеличении 250x - 450x, тогда как окрашенные фуксином - при увеличении 800x - 1000x. Разница в увеличении позволяет микроскописту видеть одновременно в 4 -10 раз большее поле зрения, что существенно сокращает время, необходимое для просмотра мазка. Подсчитано, что если микроскопическое исследование необходимой площади мазка при окраске по Ziehl-Neelsen продолжается приблизительно 10 минут, то для исследования той же площади мазка методом люминесцентной микроскопии потребуется только 2 - 3 минуты.

Люминесцентные красители для выявления микобактерий


Слайд 18
ПРИКАЗ
от 21 марта 2003 г. N 109
О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ

ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ
В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Слайд 19Микобактерии (окраска ауромин/родамин)


Слайд 20При обследовании 25 пациентов с диагнозом «зооантропонозная трихофития» использовали 2 метода

диагностики: с использованием 10%-ного раствора едкого калия (КОН) — 1-я группа и 10%-ного раствора КОН с добавлением калькофлюора белого — 2-я группа. Было установлено, что во 2-й группе положительный результат составил 88% случаев (22 больных), а в 1-й группе — 76% случаев (19 больных). Таким образом, использование калькофлюора белого на 11% повысило диагностические возможности микроскопии.

Микроскопия грибов с использованием калькофлюора белого

З.Р. Хисматуллина, Д.Р. Попова, О.Р. Мухамадеева, Г.Р. Мустафина. Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа


Слайд 21Грибы (окраска калькофлюор белый)


Слайд 22Грибы (окраска калькофлюор белый)


Слайд 23Грибы (окраска калькофлюор белый)


Слайд 24Клинический пример:


Слайд 25C.neoformans: микроскопия (нативный мазок из ликвора)


Слайд 26C.neoformans: микроскопия (окраска по Граму)


Слайд 27C.neoformans: микроскопия (окраска калькофлюор белый)


Слайд 28C.neoformans: микроскопия (окраска тушью)


Слайд 29Используется несколько красителей

Дает возможность оценить морфологические и тинкториальные особенности микроорганизма (идентификация

до рода (Грам +) и его взаимоотношения с клетками организма-хозяина

Сложные методы окраски Окраска по Граму


Слайд 30Образцы, в которых количество эпителиоцитов не превышает 10, а количество сегментоядерных

лейкоцитов более 25 в поле зрения, используются для дальнейшего исследования.

Оценка качества клинического материала до начала работы


Слайд 31Микроскопическая картина мазка


Слайд 32Нити фибрина
Щеточная кайма эпителия
Коллагеновые и эластические волокна
Фиброциты
Измененные эритроциты
Вакуоли и ядра измененных

макрофагов
Осадки красителей
Жировые капли


Причины ошибок при микроскопическом исследовании


Слайд 33Заключение должно отображать патологический процесс (количество лейкоцитов, фиброз, пролиферация), количественный и

качественный состав микрофлоры, наличие возбудителей микозов

Заключение формируется не в виде диагноза, а как развернутое описание микроскопической картины

Заключение по результатам микроскопического исследования


Слайд 34Формулировка диагноза в заключении по результатам микроскопического исследования недопустима, так как

она является прерогативой лечащего врача, а не лабораторного работника.

Заключение по результатам микроскопического исследования


Слайд 35Клиническая лабораторная диагностика
Том II

Научное общество специалистов лабораторной медицины
2012 г.
Национальное руководство


Слайд 36Микробиологический метод исследования


Слайд 37Окончательный результат с определением чувствительности к антимикробным препаратам через 4-7-10 дней

Международные

стандарты 48-72 часа (в идеале первые сутки после получения клинического материала)

Микробиологический метод исследования


Слайд 38Микробиологический метод исследования


Слайд 39Использование специальных хромогенных сред и сред с добавлением селективных добавок
Микробиологический метод

исследования

Слайд 40Микробиологический метод исследования


Слайд 41Микробиологический метод исследования


Слайд 42Микробиологический метод исследования


Слайд 43Микробиологический метод исследования


Слайд 44Зачем так много?
Рост на агаре через 24 часа инкубации
Рост на агаре

через 72 часа инкубации


Слайд 45Идентификация микроорганизмов до группы, рода, вида, подвида
Возможность определения чувствительности к антимикробным

препаратам

Микробиологический метод исследования Хромогенные среды


Слайд 46Микробиологический метод исследования
Определение продукции БЛРС
Определение MRSA с помощью хромогенных

сред

Слайд 47Позволяют сократить исследование до 2-3 дней
В некоторых случаях до 24 часов

Позволяют

выделять и идентифицировать микроорганизмы при первичном посеве
Сокращают расходы на дополнительную идентификацию

Микробиологический метод исследования Хромогенные среды


Слайд 48Микробиологический метод исследования


Слайд 49Использования для идентификации микроорганизмов современных тест-систем позволяет не накапливать чистую культуру
Идентификация

проводится с использованием одной или нескольких колоний, выросших на чашке с первичным посевом
Сокращение исследования на один день

Микробиологический метод исследования


Слайд 50Идентификация: какие варианты?


Слайд 51Автоматические анализаторы

Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования
Микробиологический метод исследования


Слайд 52Автоматические анализаторы


Слайд 53Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования


Слайд 54Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования


Слайд 55
MALDI-TOF масс-спектрометрия


Слайд 61Микробиологический метод исследования


Слайд 62



Определение чувствительности к антибактериальным препаратам


Слайд 63Благодарим за внимание


Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика