Протоночная цитометрия презентация

клетки, точнее их маркеры – CD-антигены, окрашивают флюоресцирующими антителами. Для окрашивания клеток (например, CD4+, CD8+-Т-лимфоцитов) применяют моноклональные антитела против их CD-антигенов, меченные флюоресцеинизотиоцианатом (ФИТС), дающим зеленую флюоресценцию, или фикоэритрином, дающим красное свечение.

Через исследуемый образец пропускают лазерный луч, который возбуждает свечение флюорохрома.

флюоресценцию, свидетельствующую о количестве меченых антител, связанных с клеткой. Интенсивность флюоресценции коррелирует с плотностью антигенов на поверхности клеток и может быть количественно измерена с помощью фотоэлемента. Полученные результаты преобразуются в гистограмму.

(флуоресцентные микросферы и т.п.)

событий в секунду)
анализ большого количества клеток (до 108 клеток в мл)
определение субпопуляций клеток
измерение параметров редко встречающихся клеток
объективное измерение интенсивности флуоресценции

дрожжей)
определение внутриклеточных цитокинов (спонтанная продукция и под действием различных специфических или неспецифических активаторов, таких как ФМА + иономицин, ЛПС, ФНО-альфа)
определение внутриклеточных белков, например транскрипционных факторов GATA-3, T-bet, FoxP3 для дискриминации CD4 Т-лимфоцитов
определение пролиферативной активности (выявление инкорпорированого бромдезоксиуридина)
исследование клеточного цикла
оценка клеточной цитотоксичности