Методы лабораторного исследования гемостаза презентация

Содержание

“Методы лабораторного исследования гемостаза” 1. Скрининговые исследования 2. Исследование сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза

Слайд 1Оңтүстік Қазақстан Мемлекеттік Фармацевтика Академиясы

Южно-Казахстанская Государственная Фармацевтическая Академия
СРИ
Тема:Методы лабораторного исследования гемостаза.:
Выполнила:Мынбаева

Д.
Группа:601-ТКБ
Проверила:Карабасова Б.К

Слайд 2 “Методы лабораторного исследования гемостаза”
1. Скрининговые исследования
2. Исследование сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза


Слайд 3Лабораторные методы, используемые в исследовании гемостаза:
Клоттинговые: (ВСК, ПВ, АПТВ, ТВ …)‏
Хромогенные:

(активность ATIII, PC, Pl)‏
Иммунологические:(количество отдельных факторов)‏
ПЦР: (ДНК-диагностика наследственных гемофилий и тромбофилий: аномалия Лейдена, гомоцистеинемия, дефицит AT)‏
Проточная цитофлуориметрия: (определение рецепторов тромбоцитов)‏
Нефелометрия: (исследование функции тромбоцитов по методу Born)‏

Слайд 4Клоттинговые методы:
- основаны на определении времени образования,
а также растворения сгустка

в стандартных условиях;
- определяется активность отдельных звеньев системы свертывания и фибринолиза.


Слайд 5Хромогенные методы:
- это хромогенное (оптическое) определение хромогенных (окрашенных) веществ (нитроанилина) связанных

с субстратами (белками) специфических реакций;
- так определяется активность отдельных компонентов свертывающей, антитромбиновой или фибринолитической системы.

Пример: Стрептокиназа + плазминоген** = плазмин + свободный нитроанилин**(желтая окраска)‏


Слайд 6Скрининговые тесты гемостаза:
1) Определение резистентности микрососудов:
- манжеточная проба;
-баночная проба;
-проба щипка

2) Определение

времени кровотечения:

- по Дьюка;
- по Айви;
- по Шитиковой

3) Определение времени свертывания крови:

- по Ли и Уайту


Слайд 7Манжеточная проба
Выполнение:
Создают венозный стаз путем дозированного сжатия плеча манжеткой тонометра

(90 мм на 5 минут) и подсчитывают количество петехий в в верхней ладонной поверхности предплечья и локтевого сгиба.

Клиническое значение:
Положительная проба возможна при врожденной ломкости капиляров, тромбоцитопении, значительной тромбоцитопатии, гиповитаминозе С, болезни Виллебранда, приеме непрямых антикоагулянтов, гормональном сдвиге у женщин, ДВС-синдроме.


Слайд 8Время кровотечения
- тест общего состояния сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза
Выполнение:
Определяют длительность

кровотечения из микрососудов кожи после дозированного (3 мм) прокола ее ланцетом.

Клиническое значение:
Удлинение времени кровотечения возможна при значительной тромбоцитопении, тяжелых формах тромбоцитопатии (тробастения Гланцмана), болезни Виллебранда, приеме непрямых антикоагулянтов, гормональном сдвиге у женщин, ДВС-синдроме.


Слайд 9Оценка работы первичного гемостаза


Слайд 10Оценка работы первичного гемостаза
Platelet Function аnalyzer-100
Прибор для количественной оценки гемостатической функции

тромбоцитов

Слайд 11Определение количества тромбоцитов: (170-350х10/л)‏
1) В мазке по Фонио: не может быть

рекомендован из-за малой точности.

2) Подсчет в камере Горяева после гемолиза эритроцитов оксалатом аммония.

3) С помощью автоматического счетчика в венозной крови, стабилизированной ЭДТА.

Слайд 12Исследование функции тромбоцитов
Выполняется из венозной крови, стабилизированной цитратом натрия в соотношении

1/9; в течении 1 часа после забора крови.

Богатая тромбоцитами плазма - отбирают после центрифугирования крови при 1000 оборотов /6 минут

Бедная тромбоцитами плазма - отбирают после центрифугирования крови при 3000 оборотов/ 15 минут


Слайд 13Исследование функции тромбоцитов:
РЕТРАКЦИЯ В ПЛАЗМЕ (богатой тромбоцитами)‏

Пробирка полистироловая мерная:
2,5 мл забуференного

физ.раствора
0,2 мл тромбина
0,2 мл Ca Cl2 (0,277%)‏
Добавить 0,2 плазмы, богатой тромбоцитами
Перемешать, вылить в пластиковый шприц на 5,0 мл
инкубировать 60 минут при 370С
Вынуть сгусток
Замерить объем
Расчет: Vост/ Vобщ . 100%

Слайд 14Исследование агрегации тромбоцитов
ТУРБИДИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД Борна - основан на регистрации изменений светопропускания

богатой тромбоцитами плазмы после активации индукторами.
Индукторы агрегации - естественные или искуственные активаторы:
АДФ;
Адреналин;
Коллаген;
Ристоцетин и др.

Слайд 15Агрегометр HELENA PACKS-4
СПИСОК МЕТОДИК:
Агрегация с АДФ
Агрегация с эпинефрином
Агрегация с коллагеном
Агрегация

с ристоцетином
Агрегация с арахидонатом
Активность фактора фон Виллебранда (по ристоцетин-кофакторной активности)‏
Хромогенное определение:
Антитромбина III
Плазминогена
Протеина С
Гепарина
Активности фактора VIII


Слайд 16AP 2110
Анализатор агрегации тромбоцитов предназначен для исследования in vitro агрегационных

свойств тромбоцитов турбидиметрическим методом.

Анализатор агрегации тромбоцитов АMS 600

Агрегометры


Слайд 17Агрегометр LA230 ( " БИОЛА" Россия) Двухканальный анализатор агрегации тромбоцитов
Прибор

позволяет проводить в каждом канале исследования агрегации тромбоцитов методом светопропускания и определения среднего радиуса тромбоцитарных агрегатов.

Агрегометр тромбоцитарный "CHRONOLOG CORP." (США)
Агрегометр 430 (одноканальный) Агрегометр 440VS(двухканальный) Агрегометр 470VS(четырехканальный) Оптический анализатор агрегации тромбоцитов служит для исследования агрегационных свойств тромбоцитов в плазме.

Агрегометры


Слайд 18Оптическая агрегометрия используется для исследования процессов агрегации на плазме обогащенной тромбоцитами

(PRP), а также для измерения агглютинации латексных частиц и для исследования изменения формы взвешенных частиц. Оптические агрегометры «Хроно-лог» с успехом используются во всем мире уже многие годы, начиная с 1967 г и являются «золотым» стандартом в оптической агрегометрии.
Двойной инфра-красный луч и чувствительный фотодетекторный модуль используется для определения разницы в световом прохождении между плазмой обогащенной и обедненной тромбоцитами.

Цельная кровь, разведенная кровь, плазма обогащенная тромбоцитами, отмытые тромбоциты, отмытые лейкоциты – все эти образцы могут быть измерены с помощью импедансной технологии. Корпорация «Хроно-лог» обладает патентом на применение этого метода.


Слайд 19Широкий спектр люминисцентных реакций (выброс АДФ, уровень ионизированного кальция, генерация супероксидов

и др.) может быть измерен при помощи ультра-чувствительной фотоумножительной трубки, которая испльзуется в люми-агрегометрах корпорации “Хроно-лог”. Люминисценция используется для детекции всех дефектов накопления и секреции. Этот метод также достаточно чувствительный для детекции гепарин-индуцированной тромбопении.

Слайд 20Тромбоэластограф
Гематокоагулограф ГКГМ4-02 тромбоэластограф


Слайд 21ПРИМЕРЫ ГРАФИКОВ

ОСНОВНЫЕ ИЗМЕРЯЕМЫЕ ПАРАМЕТРЫ
CT (время коагуляции) - общая активность коагуляционной системы
CFT

(время образования сгустка) и a-угол (начальная скорость оборазования сгустка) – оценка функции тромбоцитов, действия фактора XIII, полимеризации фибрина, активности гепарина
MA (или MCF) – качество сгустка, оценка его механических свойств
LOT (время наступления фибринолиза) – оценка фибринолитической активности l-угол – скорость фибринолиза

роТЭГ "
Анализатор гемостаза роТЭГ " это современный 4-х канальный компьютерный тромбоэластограф.


Слайд 22ИДЦ 2008-2011г.г.
Автоматический
коагулометр
STA-R Evolution
Roche Diagnostics,
Франция


Слайд 23Гемостаз в ИДЦ


Слайд 24Спектр анализов лаборатории гематологии ИДЦ с учетом гомеостатических методов
Полный гематологический анализ
Миелограмма
Протромбиновое

время и фибриноген
Коагулограмма стандартная
Ретикулоциты
Цитограмма (мазок из носа или глаза)
LE-клетки
Осмотическая резистентность эритроцитов
Ретракция плазменного сгустка
Агрегация тромбоцитов с АДФ
Агрегация тромбоцитов с ристоцетином
Агрегация тромбоцитов с арахидоновой кислотой
Агрегация тромбоцитов с коллагеном
Агрегация тромбоцитов с адреналином
Определение фактора Виллебранда
Активность фактора свертывания крови XII
Активность фактора свертывания крови
VIIIАктивность фактора свертывания крови IXАктивность фактора свертывания крови XI
Активность комплекса протеина С (скрининг)
Активность антитромбина III
Активность протеина С

Активность плазминогена
Активность альфа-2-антиплазмина
АПТВ с люпус-чувствительным кефалином
Время кровотечения
Коррекционно-ингибиторная проба по АПТВ Коррекционно-ингибиторная проба по ПТИ
Определение групповой принадлежности по АВО
Определение резус-антигенов
Фибринолиз
Активность фактора свертывания крови II
Активность фактора свертывания крови V
Активность фактора свертывания крови VII
Активность фактора свертывания крови X
Активность фибриназы (фактор XIII)
Коагулограмма (тромбогенный риск) Протромбиновое время (с МНО)
Фибриноген
Активированное время рекальциф Активированное парциальное тро
Тромбиновое время
Растворимые фибрин-мономерные
Содержание Д-димера


Слайд 25Диагностика тромбофилий
Диагностика гемофилий
Мониторинг противо-гемофилийной терапии для пациентов с наличием ингибитора

фактора VIII
Мониторинг антикоагулянтной терапии, направленной на ингибирование тромбина и фактора Xa (гепарин)


TGA-анализ – универсальный метод оценки тромбогенного потенциала гемостаза


Слайд 26CEVERON-ALPHA
для 4 методов анализа:
- коагулометрия АЧТВ, ПВ, ТВ, Фибриноген, Протеин

С, ВА, дефицит факторов свертывания, мутация Лейдена и другие.
- фотометрия С1-ингибитор, FVIII, Протеин С, АТ-III и другие.
- турбидиметрия Д-димер, ВА, С-реактивный белок и другие.
- флуориметрия кинетика образования эндогенного тромбина (для модификации Ceveron TGA)

Автомат CEVERON-ALPHA TGA позволяет проводить уникальный флуориметрический TGA-анализ
360/430 нм

Длины волн фотометрического блока: 405, 570, 630 и 740 нм
Скорость проведения анализов на CEVERON-ALPHA до 70 образцов/час (ПВ) (Стационар на 300-400 больных)


Слайд 27Спасибо за внимание!


Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика