Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции презентация

Зав. КДЛ: Т.Н. Емельянова
Ульяновск 2014

Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции

ВИЧ 1-го и 2-го типа, так и антигены (р 24).
1 этап – скрининговый
2 этап – референтный
3 этап – экспертный

(ИФА, Блот, ПЦР)

Исследование в динамике (ПЦР,ИФА)

Медицинское наблюдение и/или терапии

–

+

–

+

±

образованием иммунного комплекса.

Двух одинаковых копий индивидуальных антигенов в природе не существует! В диагностике используют только один вид антител, который наиболее специфичен в отношении определяемого возбудителя. То есть связывание данного вида антител с определяемым антигеном происходит всегда. Чаще всего применяются IgG и IgM.
Именно этот принцип иммунной реакции (уникальная точность и специфичность узнавания определяемого биологического объекта) лежит в основе иммуноферментного анализа.В силу высокой точности антител в узнавании антигенов, точность всего метода иммуноферментного анализа оказывается также высочайшей.

0,5 пг/мл
Антиген р24 может быть выявлен в крови методом иммуноферментного анализа уже через 1-2 недели после заражения и определяться до 8-й недели, затем его содержание резко снижается.
Далее в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечается второй подъем содержания в крови белка р 24. Он приходится на период формирования СПИД.

мононуклеарных клетках периферической крови. Используется как диагностическая методика для прямой диагностики ВИЧ-инфекции в следующих случаях:

При обследовании детей, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей. Использование ПЦР в этом случае позволяет сократить сроки постановки диагноза ВИЧ-инфекции с 18 месяцев до 3-6 месяцев.

В случае сомнительного результата ИБ.

В период серологического "окна".

в крови с целью прогноза и мониторинга уже установленной ВИЧ-инфекции.


Вирусная нагрузка отражает интенсивность репликативного процесса в инфицированных клетках.


ВН при первичной инфекции высокая и находится в интервале 104-106, но с началом сероконверсии содержание РНК в плазме крови начинает резко снижаться вплоть до уровня, не выявляемого обычными методами

позволяет:

Оценивать состояние иммунной системы.

Наряду с клинической информацией определять момент начала антиретровирусной терапии.

Определять сроки для профилактики оппортунистических инфекций .

Оценивать эффективность лечения.

к поверхностным или внутренним антигенам которых получены моноклональные антитела

труд к минимуму.

настолько высоки, что существующие сегодня другие методы оценки иммуногенетических и фенотипических свойств клеток не могут серьезно конкурировать с этой технологией.

к исследованию;
правильный забор крови;
правильная предварительная подготовка крови и своевременное проведение исследований;
правильное хранение и доставка материала в лабораторию;
материально-техническое обеспечение лабораторного исследования;
уровень квалификации медицинского персонала, проводящего исследование.

возможности контаминации одного образца другим (использование индивидуальных палочек или наконечников для обведения сгустка, использование закрывающихся пробирок при транспортировке).

Сыворотки должны быть прозрачными, без признаков хилёза, гемолиза, «проростов», клеточной взвеси.
Плазма.
Должна быть свободна от тромбоцитов.
Сроки хранения: На ИС 48 часов при комнатной температуре в темном месте.
На ИФА : сыворотка хранится в холодильнике не более 7 суток.
На ВН : если плазма не исследуется сразу, то должна быть заморожена при t – 20 град.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

системах внешней оценки качества;
для оценки правильности проводимых исследований применять стандартные контрольные материалы;
для оценки воспроизводимости исследований проводить внутрилабораторный контроль качества каждой постановки ИФА, с последующим построением контрольной карты и анализом полученных результатов;
постоянное повышать квалификацию персонала;
строго соблюдать инструкции к тест-системам