Этиология анаэробных раневых, гнойно-воспалительных, и септических инфекций презентация

2008

Лекция 4. Микробиологическая диагностика (МБД) анаэробных раневых, гнойно-воспалительных, и септических инфекций

(мионекроз) (0,5-2% раненых; обморожения; осложнения (криминальных) абортов) <– экзотоксины (α- C. perfringens, β- и γ- C. novyi) – фосфолипазы (лецитиназы), оказывают некротизирующее и гемолитическое действие
Пищевые токсикоинфекции: C. perfringens сероваров А и В продуцируют термолабильный энтеротоксин -> диарея
Другии патологии (редко): холецистит, эмпиемы и абцессы брюшной полости и органов малого таза, некротический энтерит и перитонит (редко, C. perfringens серовар С, β-токсин), инфекции после ампутации конечностей
Источники: присутствуют в составе микробиоты кишечника и в почве (особенно обработанной органическими удобрениями)

каталаз (-)
Прямая микроскопия материала (ткань, экссудат) с окраской по Граму - C. perfringens неравномерно окрашенные, споры редко видны (центрально, субтерминально), м.б. обрубленные концы; по Бурри-Гинсу (C. perfringens продуцируют капсулу)
C. novyi – подвижны (фаз. контраст), споры субтерминально

C. perfringens зоны двойного β-гемолиза
2. Желточный агар – продукция лецитиназы (преципитат)
3. Среда Вильсон-Блер (железосульфитный агар): восстановление сульфата до сульфида (образование сульфида железа [FeS])
4. Газообразование в столбиках со средой (H2)
5. C. perfringens интенсивно («ураганно») створаживают молоко

и моновалентными сыворотками к токсинам - биологический тест
ПЦР – методы для типирования токсинов
Лецитиназа в фильтратах культур: нейтрализация сыворотками (отсутствие преципитации лецитина при обработке сывороткой)
Экспресс-диагностика: иммунофлуоресценция в клиническом материале; ИФА для детекции энтеротоксина; ДНК-гибридизация

строгие анаэробы, на кровяном агаре непигментированные колонии, без гемолиза, рост при 20% желчи, устойчивы к канамицину, гентамицин, ванкомицину, колистину
Присутствуют в составе микробиоты кишечника и влагалища
Клиника B. fragilis : хирургические инфекции (до 80% случаев перитонита), абцессы органов брюшной полости,
гинекологические инфекции, сепсис (включая сепсис у новорожденных)
Диарея, колиты и рак толстой кишки
Прямая микроскопия: Грам(-) полиморфные палочки
Посев на (1) кровяной агар (2) агар с желчью + канамицин (3) агар с желчью и эскулином
B. fragilis обычно каталаз (+) (зависит от фазы роста)
Сахаролитические: API20A глюкоза (+), целлобиоза (+), сахароза (+), лактоза (+), эскулин (+)
Детекция с помощью иммунофлуоресценции (анти-ЛПС)
Некоторые штаммы продуцируют энтеротоксин - детекция гена с помощью ПЦР

Bacteroides

агаре некоторые виды пигментированные колонии (светло-коричн. – черные), без гемолиза, нет роста при 20% желчи, устойчивы к канамицину, гентамицин, ванкомицину, чувствительны к колистину. Каталаза (-)
Присутствуют в составе микробиоты полости рта, кишечника , влагалища, дыхательных путей
Клиника: инфекции полости рта/зубов (пародонтит) мягкие ткани шеи и головы, половых органов (сальпингит, эндометрит, аднексит) , перитонит, сепсис, укусы дом. животных
Prevotella copri – ассоциирована с артритом
Прямая микроскопия: Грам(-) короткие полиморфные палочки
Посев на (1) кровяной агар (2) агар с канамицином желчью и без желчи
P. melanogenica при определенных условиях продуцирует гемолизин
Слабо сахаролитические: API20A глюкоза (+), целлобиоза (-), сахароза (+/-), лактоза (+), эскулин (+/-)
Rapid ID 32A система энзиматической индентификации
Детекция с помощью иммунофлуоресценции
Детекция 16S rRNA генов с помощью ПЦР
P. melanogenica продуцируют эндотоксин и фосфолипазу А

агаре пигментированные колонии, некоторые штаммы -гемолиз, нет роста при 20% желчи, устойчивы к канамицину и колистину, чувствительны к ванкомицину; каталаза (-)
Присутствуют в составе микробиоты полости рта, кишечника , влагалища, дыхательных путей
Клиника: инфекции полости рта/зубов (Porphyromonas gingivalis: гингивит, периодонтит, пародонтит), половых органов (вагиноз, сальпингит, эндометрит, аднексит) , перитонит, сепсис
P. gingivalis ассоциирована с артритом
Прямая микроскопия: Грам(-) полиморфные палочки
Посев на (1) кровяной агар (2) агар с желчью + канамицин
Антибиотикочувствительность
P. gingivalis продуцирует гингипаины (протеазы) с коллагеназной и фибринолитической активностью
P. gingivalis агглютинирует эритроциты
Несахаролитические: API20A глюкоза (-), целлобиоза (-), сахароза (-), лактоза (-), эскулин (-)
Детекция с помощью иммунофлуоресценции и ПЦР

(-) полиморфные палочки; слабоферментативны, H2S (+), индол (+) (большинство), каталаза (-), оксидаза (-), некоторые виды устойчивы к желчи

F. nucleatum длинные веретообразные палочек с заостренными концами - латин. «fusus» – веретено
F. necrophorum - короткие коккобациллы/коккобразные, закругленные

Экология и клиника F. nucleatum: присутствуют в составе микробиоты полости рта, глотки, кишечника , влагалища:
1. зубные инфекции (периодонтит, некротизирующий гингивит)
2. бактериальный вагиноз
3. тропизм к плаценте: инфекции оболочек плодного пузыря при
беременности (хориоамнионит) --> преждевременный разрыв/роды; послеродовой сепсис новорожденных
4. роль при раке толстого кишечника

Экология и клиника F. necrophorum: присутствие в норме в глотке (?)
1. тонзиллиты, перитонзиллярные абцессы, отиты, синуситы, остемиелиты
2. Синдром Лемьера, постангинальный сепсис: первичный очаг инфекции
в ротоглотке; септицемия, тромбоз внутренней яремной вены и вторичные
очаги в легких, костях (остеомиелит), суставах (артрит), головном мозге (менингит) (септические тромбоэмболы)
3. Язвенно-некротический стоматит Венсана (в ассоциации с Treponema vincentii), а также гангренозного фимоза, гангренозного баланопостита или гангренозных язв полового члена - «ФУЗОСПИРИЛЛЕЗ»

Экология и клиника других фузобактерий: многие виды присутствуют в нормальной микробиоте; могут учавствовать в поликмиробных инфекциях органов брюшной полости (апендицит, перитонит), парапроктит, абцессы отдельных органов, раневые инфекции, инфекции ротовой полости; вагинит

кровяной агар (2) фузобактериальный агар (ванкомицин, эритромицин, генциан-фиолет.)

F. nucleatum – белые или желто-серые кол., м.б. сморщенные нет гемолиза
F. necroforum - кремовые колонии, многие β- гемолиз; позеленение агара на воздухе

Запах лежалого/выдержанного сыра/ананас (масляная к-та)

Нет роста при 20% желчи

Антибиотикочувствительность: ванкомицин R,
канамицин и колистин S

Продуцируют фосфолипазу А и В (гемолизины), ЛПС
Агглютинируют человеческие эритроциты
F. necroforum продуцируют липазу

Слабосахаролитические: API20A глюкоза (-/+), целлобиоза (-), сахароза (-), лактоза (-), эскулин (-)

ПЦР: rpoB ген F. necroforum; 16S rRNA – специфичные

цепочками (Peptostreptococcus)
Пептококки – единственный вид P. niger – черные колонии на кровяном агаре, на воздухе становятся серыми, негемолитические, каталаза (-), H2S (+), неферментирует углеводы
P. niger – часть нормальной микробиоты кишечника, влагалища, кожи
Клиника: инфекции мягких тканей, инфекции брюшной полости, постоперационные инфекции, укусы животных

Пептострептококки:
P. anaerobius инфекции кожи, мяких тканей, костей, брюшной полости напр. аппендицит (часто в ассоциациях), пневмонии, бактериальный вагиноз, поражения оболочек плода. P. stomatis: зубные инфекции, пневмония
Кровяной агар: бесцветные, негемолитические, сладковатый запах, чувстительны к полианетосульфонату и ванкомицину, резистентны к канамицину и колистину

колонии, резистентны к полианетосульфонату
P. magnus (Finegoldia magna) – мелкие
негемолитические (иногда β-гемолиз) колонии,
чувствительны к канамицину и ванкомицину,
резистентны к колистину, резистентны к
полианетосульфонату

P. magnus – наибольший патогенный потенциал: некротизирующий фасциит, абцессы, инфекции кожи, инфекции костей и суставов (особенно при имплантациях), часто как монокультура
Детекция: ПЦР (16S rRNA)