Слайд 1Вирусные заболевания растений
Слайд 2Ивановский Дмитрий Иосифович 1864-1920 г.г.
Virus – яд (лат.)
1892 г.
Д.И.
Ивановский
описал
возбудителя
табачной
мозаики у растений
Слайд 3Более 1000 различных болезней растений вызываются вирусами.
Вирусы растений или фитопатогенные
вирусы – это мельчайшие формы субмикроскопических инфекционных агентов.
Слайд 4Вирусы растений имеют ряд общих свойств:
а) не видны в световой микроскоп
(размеры от 20 до 300 нм),
б) не имеют клеточного строения,
в) не имеют собственного метаболизма, поэтому полностью зависят от клетки растения-хозяина (т. е. являются облигатными внутриклеточными паразитами),
г) содержат только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК).
Слайд 7основные типы вирусных симптомов
Мозаика – неравномерная зеленая окраска листовой пластинки
или наличия пятен желтоватого или светло-зеленого цвета
2) Хлороз – общее или симметричное пожелтение тканей листа
Слайд 8Некроз – отмирание тканей растений, часто является следствием мозаики или хлороза
при сильном их развитии, но нередко развивается и самостоятельно. Выделяют местный некроз – развивается в местах проникновения инфекции в растение и системный (рассеянный) некроз – может проявляться на любых частях растения
Слайд 9Деформации органов растений разнообразны и могут быть вызваны физиологическими нарушениями, которые
приводят к изменению морфологии органов или всего растения. В результате нарушения координаций роста развивается морщинистость, курчавость, вздутия, искривления побегов
Слайд 10Угнетение роста может выражаться в общей карликовости растений, укорочении междоузлий на
верхушке побега
Увядание наблюдается при сильном поражении сосудистой системы
Слайд 11Израстание (пролиферация). Непосредственными причинами израстания может быть нарушение покоя пазушных и
зимующих почек или перерождение и вегетативный рост генеративных органов. Сопутствующим признаком израстания является нитевидность стеблей и ростков
Абортивность – опадение цветков и завязей, усыхание завязавшихся плодов или отдельных семян в плоде, бессемянность плодов
израстание чашелистиков
Слайд 12Новообразования – опухоли на различных частях растения (например, разрастание жилок листа),
листовидные выросты энации и др.
Антоцианоз – пурпурное, красно-фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание листьев или их краев, жилок, стеблей
Слайд 13Пестролепестность – неравномерность окраски или частичное обесцвечивание лепестков, например, у тюльпана
Слайд 15Методы изучения вирусов
1) Электронная микроскопия. Разрешающая способность электронного микроскопа – до
1А. Изображение объекта получается в результате рассеяния потока электронов исследуемым образцом. Пучок движущихся в вакууме электронов фокусируется электрическим или магнитным полем (электронными линзами). Этим методом можно определить форму и размеры вирионов, локализацию в клетке, в растении, цитологические изменения клеток.
Слайд 162)Ультрацентрифугирование. Центрифуги, которые развивают скорость более 40 000 оборотов в минуту
называются ультрацентрифугами. В результате развивается добавочная сила тяжести, которая способствует осаждению мелких частиц, каковыми и являются вирусы.
Слайд 173)Электрофорез. Все вирусы в составе капсида содержат ионизированные группировки, которые обусловливают
их подвижность в электрическом поле. Скорость движения вирусных частиц зависит от молекулярной массы и суммарного заряда. Благодаря этому методу стало возможно разделение смеси вирусов с помощью электрофореза – перемещения в электрическом поле.
Слайд 184)Иммунологические (серологические) методы. Любой вирус, будь то вирус растений, животных или
бактерий, при введении кроликам или другим мелким млекопитающим ведет себя как эффективный антиген. В результате образуются специфические антитела, которые реагируют с антигенами (вирусами) и используются для их обнаружения.
Искомый антиген (1) и меченый ферментом антиген (2) конкурируют друг с другом за антитела (1), сорбированные на твердой фазе
Слайд 19Этот антиген вводят внутривенно или внутрибрюшинно кролику. Количество инъекций может быть
различное (4-8) с интервалом в 1-2 дня. Через 7-11 дней после последней инъекции производят забор крови, ее отстаивают 1,5-2 часа при температуре 370С, затем центрифугируют. Сыворотку хранят в ампулах по 5-10 мл при температуре - 40С.
Для получения диагностической антисыворотки в качестве антигена применяют очищенный вирус.
Слайд 20К основным методам обнаружения реакций антиген-антитело относятся реакции преципитации и агглютинации.
Преципитация
(от лат. praecipitacio – падение вниз, осаждение) – реакция, позволяющая осадить вирусы (антигены) с помощью антител, обладает высокой чувствительностью и специфичностью.
Агглютинация (от лат. agglutinatio – склеивание) – склеивание в глыбки (комочки) микроорганизмов, в т. ч. вирусов и выпадение их в осадок. Используется для диагностики вирусных болезней.
Слайд 215) Метод растений-индикаторов. Метод основан на визуальном контроле. При инфицировании растении
вирусами появляются симптомы поражения, которые зависят от растения хозяина, штамма вируса и условий внешней среды. Растения-индикаторы – это растения, которые реагируют характерными симптомами на заражение вирусом. Для инфицирования используют молодые растения в фазе 2-3 настоящих листьев. Заражение (инокуляцию) проводят экстрактом больных тканей.
Для этого их растирают в ступке с буферным раствором, гомогенат фильтруют через марлю или капрон. Чаще всего инокуляцию проводят механическим путем : экстракт втирают пальцами, тампоном, шпателем, щеткой или кистью. Через 5-10 минут излишек вирусного материала смывают дистиллированной водой. Растения маркируют, закрепляя этикетки на инфицированных листьях. Растения помещают на сутки в темное место, затем переносят в фитотрон на 12-14 дней до четкого проявления вирусных симптомов. Производят идентификацию вирусных поражений с помощью таблиц и фотографий.
Слайд 22Выделяют четыре основных типа реакций растений-индикаторов на поражения их вирусом:
Иммунность –
когда растения не поражаются данным вирусом;
Сверхчувствительность – когда растения поражаются с образованием локальных некрозов, которые возникают вследствие отмирания клеток возле точки заражения;
Толерантность – когда вирус транспортируется по тканям растения, но симптомы заболевания выражены слабо;
Системное поражение – когда вирус транспортируется по всем тканям растений с четким проявлением симптомов заболевания.