Иммунитет. Как защититься от защиты? презентация

Проблема и ее анализ ПРОБЛЕМА Создание тест системы для определения предрасположенности к неправильному питанию на основе ПЦР диагностики вариантов гена-вкуса htas2r38 Делаем жизнь человека безопасной СУЩЕСТВУЮЩИЕ РЕШЕНИЯ ВОЗМОЖНЫЕ РЕШЕНИЯ АКТУАЛЬНОСТЬ

Слайд 1Иммунитет. Как защититься от защиты?
Делаем жизнь человека безопасной

РУКОВОДИТЕЛЬ:
Вдовенко Дарья Юрьевна
Вдовин Александр

Сергеевич

УЧАСТНИКИ:
Драгони Оливия
Кашин Кирилл
Невская Анастасия
Тараторкин Федор
Хованская Анна

Слайд 2Проблема и ее анализ
ПРОБЛЕМА
Создание тест системы для определения предрасположенности к неправильному

питанию на основе ПЦР диагностики вариантов гена-вкуса htas2r38

Делаем жизнь
человека безопасной

СУЩЕСТВУЮЩИЕ РЕШЕНИЯ

ВОЗМОЖНЫЕ РЕШЕНИЯ

АКТУАЛЬНОСТЬ

В настоящее время популярно мнение о том, что иммунитет человека нуждается в постоянной стимуляции. Однако, в результате этого множество людей начинают страдать от аутоиммунных заболеваний и системных воспалений.

Механизм влияния активированных клеток на здоровые ткани и работа иммунитета в целом очень мало изучены, однако их понимание является важным элементом обеспечения безопасного существования человека.

Подавление иммунных реакций – иммунная супрессия.

Изучение влияния активированных иммунных клеток на другие клетки организма, не нуждающиеся в нем, и последующий поиск возможных блокаторов этих реакций.


Слайд 3ЦЕЛЬ ПРОЕКТА
ц
Изучение влияния активированных иммунных клеток на другие клетки организма на

примере эндотелия и фибробластов

ЗАДАЧИ ПРОЕКТА

Выделение, активация иммунных клеток и оптимизация этих процессов (CD3 – Т-клетки).

Изучение влияния активированных Т-клеток на клетки эндотелия сосудов (сердечные микроваскулярные клетки и клетки аорты).

Изучение влияния активированных Т-клеток на фибробласты (кожные и лёгочные).

Создание тест системы для определения предрасположенности к неправильному питанию на основе ПЦР диагностики вариантов гена-вкуса htas2r38

Делаем жизнь
человека безопасной

Цели и задачи проекта


Слайд 4Проточная цитофлуориметрия (FACS)
Иммуноферментный анализ (ELISA)
Флуоресцентная микроскопия
Искусственная активация клеток и

ведение совместных культур

Флуорисцентная микроскопия

МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ

ELISA

FACS

Методы, материалы
и оборудование

Иммунитет. Как защититься от защиты?

Делаем жизнь
человека безопасной


Слайд 5Культивирование клеток
MACS (магнитный сортинг специфических субпопуляций клеток)
Окрашивание MitoSOX на АФК (образование

супероксида)

Работа проводилась на культурах человеческих клеток дермальных, фетальных дермальных и легочных фибробластов и сердечных микроваскулярных эндотелиальных клетках и клетках эндотелия аорты методом совместных культур с активированными Т-клетками человека.

МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ

Методы, материалы
и оборудование

Иммунитет. Как защититься от защиты?

Делаем жизнь
человека безопасной


Слайд 6ОСНОВНАЯ СХЕМА ЭКСПЕРИМЕНТОВ
Методы, материалы
и оборудование
Иммунитет. Как защититься от защиты?
Делаем жизнь


человека безопасной

T-клетки человека

MACS

CD4+ T-клетки

CD8+ T-клетки

Проверка пролиферации (CFSE)

Культуры клеток человека

Активация Dynabeads


Слайд 7СВЕТОВАЯ МИКРОСКОПИЯ
Анализ морфологии клеток через 24 часа
Методы, материалы
и оборудование
Иммунитет. Как

защититься от защиты?

Делаем жизнь
человека безопасной

Отрицательный контроль

Контроль с бидсами

Клетки с CD8

Клетки с CD4

Клетки с CD4 и CD8

Положительный контроль с TNFα


Слайд 8Результаты работы
MitoSOX - анализ стресса в клетках эндотелия
MitoSOX – вещество, которое

при взаимодействии с супероксидом (перекись водорода) меняет свой цвет на красный. Клетки, которые стрессуются, выделяют именно такой вид оксида, поэтому с помощью MitiSOX-а можно регистрировать стресс клеток.

Окрашивание HCMVECs
blue – DAPI
red - MitoSOX

Иммунитет. Как защититься от защиты?

Делаем жизнь
человека безопасной

ctr

TNFα

T cells


Слайд 9Результаты работы
Анализ стресса в фибробластах
Иммунитет. Как защититься от защиты?
Делаем жизнь
человека

безопасной

αSMA - green
Phalloidin – red
DAPI – blue

К фибробластам слева лимфоциты не добавлены, а справа- добавлены.


Слайд 10Детекция молекул адгезии в эндотелиальных клетках
Окрашивание на CD31 –
маркер эндотелиальных

клеток

Определение субпопуляции нужных клеток по светорассеиванию

Выбор отдельных клеток (исключение дубликатов и кластеров)


Слайд 11Детекция молекул адгезии в эндотелиальных клетках


Слайд 12ELISA по TNF-α (фактор некроза опухоли)
Эндотелий
Фибробласты


Слайд 13Выводы и анализ результата
ВЫВОДЫ И АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТА
Иммунные клетки (CD4 и CD8)

были выделены и активированы самым эффективным способом (пролиферация до 3х циклов деления у 90% клеток) способом. Для этого использовалось магнитная MACS сепарация.
Было выявлено отрицательное влияние гиперактивированных Т-клеток на здоровые клетки эндотелия, наблюдаемое в результате изменения морфологии и интенсивного выделения веществ, характерных для клеток, находящихся в состоянии стресса.
Было выявлено отрицательное влияние активированных Т-клеток на здоровые фибробласты, наблюдаемое в результате изменения морфологии и интенсивного выделения веществ, характерных для клеток, находящихся в состоянии стресса.


Создание тест системы для определения предрасположенности к неправильному питанию на основе ПЦР диагностики вариантов гена-вкуса htas2r38

Делаем жизнь
человека безопасной

Активация иммунитета является необходимым фактором защиты организма, но несвоевременная искусственная гиперактивация может быть опасной для здоровых клеток организма и приводить к непредвиденным последствиям.


Слайд 14БЛАГОДАРНОСТИ
Благодарим своих руководителей
Александра Сергеевича Вдовина
Дарью Юрьевну Вдовенко
Куратора направления

Юрия Олеговича Молодых
Руководителя лаборатории «Биохакинг» Александра Ефремова
лаборантов, своих коллег и весь центр «Сириус»!

И, конечно же, древних миног и миксин, которые развили иммунитет и теперь мы можем его изучать!

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!


Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика