Доля устойчивых штаммов, %
Число новых антибиотиков,
введённых в практику
Резистентность к антибиотикам ― это причина поиска новых действующих веществ.
Недостатки прочих методов для определения механизма:
большинство из них требует in vitro экспериментов и слишком сложны для широкомасштабного поиска.
Недостатки стандартных методов поиска новых антибиотиков
РИБОСОМА –
мишень более половины антибиотиков
Плазмида
Антибиотики, воздействующие на синтез белка
Антибиотик,
НЕ
воздействующий на синтез белка
Вывод
2) Приготовление ночной культуры.
Добавляли одну колонию с чашки с трансформированными клетками в 2 мл среды LB с ампициллином. Ставили в термостат на 16 часов на 37 С при постоянном вращении 200 об/мин.
3) Использование двойной репортёрной системы для анализа механизма действия антибиотиков на чашках с агаром.
Ночную культуру штамма ΔtolC, трансформированных плазмидами pRFPCER-TrpL2A, разбавляли в два раза свежей средой LB и выливали на чашки с агаром, средой LB и ампициллином (50 мкг/мл). Затем на поверхность высохших чашек делали углубления диаметром 5 мм, потом наносили образцы (50 мкл экстрактов, (ery) эритромицин ― 50 мкл раствора 0,1 мг/мл, (lev) левофлаксацин 50 мкл 0.1 мкг/мл). После культивирования в течение ночи при 37 С при постоянном вращении 200 об/мин полученные чашки документировались при помощи цифровой камеры при освещении их ультрафиолетом (254 нм).
4) In vitro трансляция.
Для in vitro трансляции использовали мРНК люцеферазы сверчка, S30 экстракт E. coli. Активность синтезированной люцеферазы определяли через 10 минут.
Изображения взяты из Яндекс Картинки и Википедии.
Источники:
Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:
Email: Нажмите что бы посмотреть