Внеклеточные НК. Циркулирующие ДНК и РНК. Роль в развитие злокачественных новообразований презентация

Бузенкова А.В.
гр.4203, МБФ

микроРНК свободно циркулирующими в крови и других биологических жидкостях.
Внеклеточные НК могут появляться в кровотоке в результате:
гибели ядросодержащих клеточных элементов;
созревания эритроцитов и тромбоцитов;
активной секреции НК во внеклеточное пространство;
продукции опухолевыми клетками (маркёры опухолевого роста).
!!! Также выделяют:
фетальное ДНК в крови женщин (уже на 1-ом месяце беременности);
нуклеиновые кислоты возбудителей при различных инфекционных заболеваниях.

содержимого в ходе некроза

НЕКРОЗ характерен для опухолевой ткани из-за присущей ей гипоксии, ведет к высвобождению клеточного
содержимого, фрагментации молекул и их фагоцитозу

информации циркулирующими НК от опухолевых клеток к здоровым.
ДНК, выделяющаяся из клеток опухоли в кровь, переносится к другим клеткам, возможно, стволовым, которые трансформируются во «вторичную» опухоль

В культуру клеток NIH/3T3 вносили образцы плазмы крови больных колоректальным раком, содержащей мутантный K-ras, и образцы плазмы здоровых людей. В стандартные чашки с культурой клеток добавляли плазму больных, во-первых, на- прямую, а вовторых, через мембрану с пора- ми 0,4 мкм для того, чтобы исключить контакт с циркулирующими опухолевыми клетками хозяина. В большинстве экспериментов обнаружен перенос генетического материала человека в культуру NIH/3T3 клеток.

диагностике:
Нормальные клетки, как правило, гибнут путём апоптоза. В следствие чего, в кровоток высвобождаются дискретные фрагменты ДНК и РНК мононуклеосомного размера (около 150 пар оснований).
Клетки опухолей, в следствие гипоксии, гибнут путём некроза. Образующиеся и высвобождающиеся при этом НК гетерогенны и имеют размеры в интервале от 200 до 400 пар оснований.

на предмет присутствия в ней «опухолевых» нуклеиновых кислот была названа «жидкостной биопсией» и служит нескольким целям:
Выявление молекулярно-генетического типа опухоли на ранних стадиях, даже в условиях малой популяции клона опухолевых клеток (обуславливающих лекарственную устойчивость).
Обычная биопсия, позволяющая получить лишь одиночные фрагменты ДНК, не способна (в отличие от жидкостной) дать полное представление о клональной гетерогенности и мутационном профиле опухолевых клеток.
Малоинвазивный подход, может повторяться многократно (до и после удаления опухолевого очага).
Онкоспецифичность и универсальность. Все опухолевые клетки имеют какие-либо генетические или эпигенетические дефекты.

основе канцерогенеза, обнаруживаемые в крови маркеры подразделяют на несколько типов:

мутации онкогенов и генов-супрессоров (кластерные, сосредоточенные в пределах 1–3 кодонов, как в случае онкогенов RAS, или рассеянные по длине гена, как в случае генов-супрессоров ТР53 и APC APC);

феномен потери гетерозиготности (LOH, loss of heterozygocity – исчезновение одной аллели какого-либо гетерозиготного локуса), что обычно служит указанием на делецию гена-супрессора

!!! Кроме того, показателями онкологической патологии могут служить:
увеличение концентрации и степени полимерности цДНК;
появление в крови специфических вирусных последовательностей;
накопление специфических мРНК и микроРНК.

аберрантное метилирование так называемых CpG-островков в промоторах генов-супрессоров.

Бузенкова А.В.
гр.4203, МБФ