Основы современной иммуногематологии презентация

Содержание

Приказ МЗ РФ № 2 от 09.01.1998 г. «Об утверждении инструкций по иммуносерологии» Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ: Метод. Указ. МЗ РФ №

Слайд 1 Основы современной иммуногематологии 2014 г.

Слайд 2Приказ МЗ РФ № 2 от 09.01.1998 г. «Об утверждении инструкций

по иммуносерологии»
Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ: Метод. Указ. МЗ РФ № 2001/109, 2002 г.
Постановление правительства РФ № 1230 от 31.12.2012 «Об утверждении правил и методов исследований и правил отбора образцов донорской крови, необходимых для применения и исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови, её продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно- инфузионной терапии»


Нормативные документы, определяющие перечень и объём иммуногематологических исследований пациентов и доноров :

Слайд 3 В настоящее время вместе с эритроцитарными антигенами открыто более 500 антигенов

клеток крови и белков плазмы, которые создают свыше 40 различных антигенных систем крови, сочетания же различных антигенных систем образуют в человеческой популяции множество антигенных комбинаций.
Поэтому, несмотря на подбор донора и реципиента по системам АВО эритроцитов, всегда имеется несовместимость в других антигенных структурах их крови, приводящая к иммунизации организма реципиента.

Слайд 4На мембранах лейкоцитов помимо антигенов системы ABO, MN, Левис содержатся антигены

гистосовместимости HLA (от Human Leucocyte Antigens), представленные более чем 150 антигенами, а также антигены нескольких других генетических систем — NA, NB, NC, ND, NE и др. Лейкоцитарные антигены находятся в растворимой форме в плазме крови, присутствуют на поверхности других клеток крови.

Слайд 5Антигены гистосовместимости HLA представлены и на поверхности тромбоцитов. Несовместимость по антигенам

HLA комплекса у донора и реципиента при переливании цельной крови и ее компонентов (лейкоцитарной или тромбоцитарной массы) приводит к иммунизации реципиента. Образовавшиеся в организме реципиента антитела против антигенов системы HLA или антигенов лейкоцитов NA-NE при повторном переливании крови реципиенту вызывают различные осложнения (лихорадку, возникающую в результате освобождения пирогенных веществ из поврежденных антителами лейкоцитов; антитела вызывают разрушение донорских лейкоцитов и тромбоцитов и др.).

Слайд 6Антигены эритроцитов:
Структурные компоненты мембран эритроцитов
Передаются по наследству
Обладают иммуногенностью (вызывают выработку антител)
Взаимодействуют

с антителами, образуя комплекс антиген-антитело


Слайд 7 В настоящее время известно 236 антигенов эритроцитов, которые объединены в 29

систем.

Большинство антигенов эритроцитов крови человека было открыто при изучении причин посттрансфузионных осложнений гемолитического типа или гемолитической болезни новорожденных и получило название по имени лиц, у которых обнаружена данная патология.

Слайд 8АНТИГЕНЫ ЭРИТРОЦИТОВСИСТЕМЫ АВО

Слайд 9Особенность системы АВО
Характерной особенностью, отличающей систему антигенов эритроцитов АВО от других

систем антигенов, является постоянное присутствие в сыворотках людей (кроме лиц с группой АВ) антител, направленных к антигенам А или В.
Антитела к антигенам эритроцитов других систем не являются врожденными и вырабатываются вследствие антигенной стимуляции.

Слайд 10Характеристика анти-А и анти-В антител

Естественные антитела анти-А, анти-В принадлежат к иммуноглобулинам класса

М.

Выработанные в процессе иммунизации А и В антигенами анти-А и анти-В антитела являются иммунными и принадлежат к иммуноглобулинам класса G.

Слайд 11Характеристика антигенов А и В
У взрослых людей на эритроцитах могут присутствовать

следующие антигены системы АВО: А, В, Н.
Антиген Н является предшественником антигенов А и В, а также обнаруживается на поверхности эритроцитов, принадлежащих к группе крови О, в незначительном количестве в группах крови А, В и АВ.
Антигены А, В и Н по химической природе являются гликолипидами и гликопротеинами.

Слайд 12Антигены и антитела системы АВ0

Слайд 13Варианты антигенов А и В
В 1911 году было установлено, что существует

две подгруппы А антигена: А1 и А2. Среди европейцев 80 % индивидов, принадлежащих к группе А, имеют подгруппу А1, остальные 20% принадлежат к подгруппе А2.

В 1956 году описана А3 подгруппа антигена А. Антигены А: А2, А3, Ах, не являются разными антигенами, а представляют собой варианты антигена А

Слабые формы В антигена также существуют: В3, Вх, Вw, но они крайне редки среди населения Европы, чаще встречаются среди населения Китая.

Слайд 14Различия между А1 и А2 антигенами являются качественными и количественными.

Слабый

антиген А2 даёт слабую и позднюю агглютинацию.

В результате ошибочно

кровь А2 может быть отнесена к О (I) группе

А2В — к В (III) группе крови

Слайд 15А1> А2> А3> ...Ах

Слайд 16РЕЦИПИЕНТАМ С ГРУППОЙ КРОВИ А2,3,4 — х (II) НЕОБХОДИМО ПЕРЕЛИВАТЬ ОТМЫТЫЕ

ЭРИТРОЦИТЫ О (I), СЗП — А(II)

РЕЦИПИЕНТАМ С ГРУППОЙ КРОВИ А2,3,4В (IV) - НЕОБХОДИМО ПЕРЕЛИВАТЬ ОТМЫТЫЕ ЭРИТРОЦИТЫ В (III), СЗП — АВ (IV)

РЕЦИПИЕНТАМ С ГРУППОЙ КРОВИ АВ2 — (IV) НЕОБХОДИМО ПЕРЕЛИВАТЬ ОТМЫТЫЕ ЭРИТРОЦИТЫ А (II), СЗП — АВ (IV)

Слайд 17АНТИГЕНЫ ЭРИТРОЦИТОВ СИСТЕМЫ РЕЗУС

Слайд 18Разновидности антигена D
Антиген D состоит из структурных единиц – эпитопов.
Нормально выраженный

D антиген: на эритроцитах присутствуют все эпитопы (большинство индивидов).
D слабый: сниженное количество (в 3-10 раз) антигенных детерминант на эритроцитах.
D вариантный: количество антигенных детерминант не снижено, но они отличаются качественно.
Варианты антигена D (слабый, вариантный) встречаются редко.

Слайд 19Антигены системы Резус
С с D E e
встречаются со следующей частотой:
D – 85%
C – 70%
Е

– 30%
с – 80%
е – 97,5%

Слайд 20* Антигена d не существует * dd обозначает отсутствие в

фенотипе антигена D * Dd – генотип гетерозиготы по этому признаку

Слайд 21

ссddее D — отрицательный , Rh-отрицательный (реципиент и донор)

сСddее D —

отрицательный, Rh-положительный донор, но резус — отрицательный реципиент

ссddЕе D — отрицательный , Rh-положительный донор, но резус — отрицательный реципиент




Слайд 22Частота встречаемости фенотипов системы резус

CcDее – 34%

ССDее – 19,5%

СсDЕе

(полный фенотип) – 14%

ссddее (D и резус – отрицательный) – 13%

ссDЕе – 12%

ссDее – 3%

сDЕЕ – 2,9%

Ссddее – 1%

СсddЕе – 0,5%

ссddЕе - 0,1%







Слайд 23Сw – встречается у 2% людей
СсСwDее
(вариант фенотипа)

Слайд 24Антитела к антигенам эритроцитов системы Резус


Главным отличием системы Резус от системы АВО

является то, что в крови людей содержатся только антигены этой системы, а антител по отношению к ним, подобных антителам анти-А и анти-В системы АВО, обычно в норме у людей не имеется.
Антитела к антигенам системы Резус являются иммунными антителами и появляются в организме в результате трансфузий эритроцитов доноров, содержащих антигены, отсутствующие у реципиентов, а также при иммунизации матери эритроцитами плода.
Частота встречаемости антител к антигенам системы Резус различна и определяется иммуногенностью антигенов и частотой их встречаемости в популяции.
Чаще всего в России в крови доноров и реципиентов выявляются анти-D антитела.


Слайд 25Иммуногенность антигенов системы Резус представлена следующим образом:


D>c>E>Сw>C>e

Слайд 26 Определение групп крови проводят:
По антигенам, содержащимся в исследуемых эритроцитах, в этом

случае для исследования используют стандартные изогемагглютинирующие сыворотки или моноклональные антитела (цоликлоны);
По антигенам, содержащихся в исследуемых эритроцитах, и антителам, содержащимся в исследуемой сыворотке. В этом случае используют стандартные изогемагглютинирующие сыворотки или моноклональные антитела, а также стандартные эритроциты групп А, В и О (перекрестный метод).

Слайд 27Материал для исследования
Определение производится в нативной крови, взятой в консервант (цитрат

натрия, ЭДТА, гепарин), в крови, взятой без консерванта, в том числе взятой из пальца.
Гемолизированный образец должен быть заменен новым образцом, хилезная кровь также не используется.

Определение группы крови проводится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25° С.

Слайд 28Инструкция по применению Цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ
Приказ №2 МЗ РФ

от 09.01.1998г.

Слайд 29Назначение
Цоликлоны анти-А, анти-В и анти –АВ предназначены для определения групп крови

человека системы АВО в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно поликлональным иммунным сывороткам.

Слайд 32Характеристика и основные свойства цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ
Моноклональные анти-А и

анти-В антитела продуцируются двумя мышинными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М.

Изготавливаются из асцитной жидкости мышей- носителейанти-А и анти-В гибридом.Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител.

Технология изготовления реагента исключает возможность контаминации патогенными для человека вирусами.

Слайд 33Определение группы крови человека системы АВО с помощью цоликлонов
Определение производится в

нативной крови, взятой в консервант, без консерванта, в том числе, взятой из пальца.

Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости.

Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре +250С

Слайд 34


1. Нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками Цоликлоны анти-А, анти-В

и анти-АВ по одной большой капле ( 0.1 мл) под соответствующими надписями.
2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови(0,01-0,03 мл).
3. Смешайте кровь с реагентом.
4. Наблюдайте за ходом реакции с Цоликлонами визуально при лёгком покачивании пластины в течение 3 минут.


Техника определения групп крови человека системы АВО с помощью цоликлонов

Слайд 35ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ

Слайд 36При взаимодействии АГ+АТ возможны реакции:

▪ агглютинация
▪ преципитация
▪ гемолиз



Эта реакция (АГ+АТ) специфична

и обратима, т.к. связи могут разрываться (элюция)

Слайд 372 фаза
Вторым активным центром АТ фиксируется на детерминантах других эритроцитов и

образуется решётка.
Именно эта фаза определяется «глазом». Это и есть агглютинация.

Слайд 38НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ РЕАКЦИИ АГ+АТ УСЛОВИЯ
1. Идентичность АГ и АТ («ключ к

замку»)
2. Количественное соотношение молекул АГ и АТ, особенно во 2-ю фазу (поэтому при определении АГ АВО - соотношение 1:10). При нарушении соотношения — реакция не идёт. Феномен «прозоны». Агглютинация слабая или отсутствует.
3. АГ должен быть активным (достаточно экспрессивным)
4. Принадлежность АТ к определённому классу. JgМ в реакцию вступают быстрее.
5. Необходимая температура. АТ бывают тепловые и холодовые. (тепловые при t > 27 оС работают хуже. Тепловые АТ взаимодействуют при t 37 оС.

Слайд 396. Необходимая рН среды. Анти-А и анти-В АТ менее прихотливы: рН

≈ 7. Анти Rh — АТ: рН ≈ 7,6-8.
7. Необходимая концентрация электролитов. Ионы Na и Cl нейтрализуют противоположные заряды ионов АТ.
8. Состояние среды. В норме эритроциты отталкиваются. Коллоиды и протеолитические ферменты уменьшают это отталкивание, что позволяет сближению и возможности взаимодействия АТ с мембраной эритроцитов ( добавление каллоидных растворов: полиглюкина, желатина и др.). Сближению также способствует центрифугирование.
9. Время реакции (инкубация). При уменьшении времени — не наступает 2 фаза. При увеличении времени АТ «уходят» от АГ эритроцитов — агглютинация уменьшается.

Слайд 42 Метод агглютинации в геле для определения антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител
Гелевая

технология в микропробирках была предложена Y.Lapierre в 1989г. Метод основан на агглютинации эритроцитов в агаровом геле «сефадекс», помещенном в микропробирки. Методика агглютинации в геле была разработана с целью стандартизации реакций гемагглютинации и получения достоверных результатов.
Гелевая технология предусматривает разделение эритроцитов при центрифугировании, при этом неагглютинированные эритроциты проходят через гель и оседают на дне пробирок (отрицательный результат), в то время как агглютинированные эритроциты задерживаются на поверхности или в толще геля (положительный результат).





Слайд 43Оценка результатов реакции агглютинации в гелевом тесте

отрицательный (-) – эритроциты формируют

на дне микропробирки компактный осадок.
очень слабоположительный (1+) – агглютинаты располагаются в нижней трети геля;
слабоположительный (2+) – агглютинаты фиксированы в верхних двух третях геля;
положительный (3+) – агглютинаты располагаются в верхней трети столбика геля;
сильноположительный (4+) – образовавшиеся агглютинаты эритроцитов задержались на поверхности геля.


Слайд 44


Причины ошибок при исследовании групповой принадлежности крови


технические погрешности

недостаточно высокое качество реактивов

индивидуальные особенности исследуемой крови

Слайд 45 Технические ошибки при исследовании групповой принадлежности
Неправильная маркировка пробирок с кровью, взятой

на исследование (перепутывание пробирок от разных индивидов);
Ошибочный порядок нанесения агглютинирующих сывороток или цоликлонов на планшет, неправильная регистрация результатов исследования;
Нарушение техники исследования:
- неправильное соотношение цоликлонов (сыворотки) и исследуемых эритроцитов;
- использование реактивов с истекшим сроком годности;
- сокращение времени наблюдения за реакцией;
Проведение исследования при температуре окружающей среды выше 25 °С, что может привести к ложноотрицательной реакции.

Слайд 46\ Характер затруднений при определении группы крови

1. Полиагглютинабельность эритроцитов

2. Изменением свойств крови

при патологических состояниях (снижение активности АГ и АТ)

3. Наличие в исследуемой крови слабых и вариантных АГ эритроцитов систем АВО и Резус

4. Кровяные химеры




Слайд 47Кровяные химеры — одновременное присутствие в крови эритроцитов разных групп крови

по системе АВО или разных фенотипов по системе Резус

ИСТИННЫЕ

встречаются у разнояйцевых близнецов и при пересадке аллогенного (донорского) костного мозга

ТРАНСФУЗИОННЫЕ появляются после массивных гемотрансфузий (2-3 л) или многочисленных при переливании О(I) в А(II), В(III), при переливании неидентичной по резус — фенотипу крови. Нестойкие, исчезают через 2-3 месяца. Хорошо выявляются в гелевом тесте; на плоскости — мелкая агглютинация на розовом фоне

Слайд 48Частота аллоиммунизации в некоторых популяциях - В США -2,4%, наиболее часто выявляются

антиК и антиЕ- АТ - В Индии – 3,5%, преимущественно анти-с - В России - 3-4%, наиболее часто антиD, что связано с отсутствием профилактики сенсибилизации D-отрицательных женщин при беременности D-положительным плодом.

Слайд 49Показания для индивидуального подбора
Отягощенный трансфузионный или акушерский анамнез (реакции и

осложнения на прежние гемотрансфузии, беременности, закончившиеся рождением новорожденных с желтухой или другими признаками ГБН)

Больные, имеющие антиэритроцитарные аллоантитела в сыворотке

 Положительный или сомнительный результат индивидуальных проб на совместимость

 Больные, которым предполагается проведение многократных трансфузий (например, онкогематологические)

Новорожденные с признаками гемолитической болезни

Слайд 50Классификация посттрансфузионных осложнений иммунологического типа
НЕМЕДЛЕННЫЕ
(возникают в момент трансфузий в

течение нескольких часов)

ОТСРОЧЕННЫЕ
(возникают через несколько дней, месяцев или лет после трансфузии)

ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ
АЛЛОИММУННЫЕ
ТРОМБОЦИТАРНО-РЕФРАКТЕРНЫЕ
БОЛЕЗНЬ «ТРАНСПЛАНТАНТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА»
ИММУНОМОДУЛЯТОРНЫЕ

ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ
ФЕБРИЛЬНЫЕ НЕГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ
КРАПИВНИЦА
АНАФИЛАКТИЧЕСКИЕ
ОСТРАЯ ЛЁГОЧНАЯ НЕДОСТАТОЧНОСТЬ СВЯЗАННАЯ С ТРАНСФУЗИЕЙ

Слайд 51Интерпретация результатов лабораторного расследования
Подтверждением иммунного характера возникшего посттрансфузионного осложнения являются:

Положительный

ПАГТ (прямой антиглобулиновый тест – прямая проба Кумбса)
Положительный НАГТ (непрямой антиглобулиновый тест – непрямая проба Кумбса)
Снижение титра АТ
Наличие кровяных химер

Слайд 52Спасибо за внимание!

Похожие презентации

Воспалительные заболевания половых органов специфической этиологии 562
Индивидуальді жазылым бойынша ұнтақ тәрізді формада шығарылатын косметикалық препараттар 604
Иммунологические маркеры аутоиммунных заболеваний желудочно-кишечного тракта 299
Болевой синдром после облучения 234
Артериальная гипертензия 520
Оценка эффективности и фармакоэкономический анализ методов лечения пациенток, страдающих раком тела матки I стадии 281

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.

Для правообладателей

Яндекс.Метрика