- Главная
- Разное
- Дизайн
- Бизнес и предпринимательство
- Аналитика
- Образование
- Развлечения
- Красота и здоровье
- Финансы
- Государство
- Путешествия
- Спорт
- Недвижимость
- Армия
- Графика
- Культурология
- Еда и кулинария
- Лингвистика
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Маркетинг
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Методы иммунодиагностики нарушений фагоцитарных процессов презентация
Содержание
- 1. Методы иммунодиагностики нарушений фагоцитарных процессов
- 2. Методы определения хемотаксиса лимфоцитов Исследование хемотаксиса в трансвелл-планшетах Метод миграции под агарозой
- 3. Исследование хемотаксиса в трансвелл-планшетах Клетки проходят через
- 4. Метод миграции под агарозой Клетки проходят
- 5. Определение адгезивных свойств Селектины – «качение» клеток
- 6. Определение адгезивных свойств Использование моноклональных антител и
- 7. Определение фагоцитарного числа
- 8. Определение образования активных форм кислорода (АФК) НСТ-тест
- 9. Определение дегрануляции нейтрофилов Два типа гранул в
- 10. Определение АГ-представляющей функции фагоцитов Смешанная лейкоцитарная реакция
Методы определения хемотаксиса лимфоцитов Исследование хемотаксиса в трансвелл-планшетах Метод миграции под агарозой
Слайд 2Методы определения хемотаксиса лимфоцитов
Исследование хемотаксиса в трансвелл-планшетах
Метод миграции под агарозой
Слайд 3Исследование хемотаксиса в трансвелл-планшетах
Клетки проходят через мембрану по градиенту хемоаттрактанта
Не прилипающие
клетки выделяют и подсчитывают на проточном цитометре
Прилипающие клетки
Отделяют от мембраны и подсчитывают
Фиксируют на мембране и подсчитывают
Хемотактический индекс вычисляют как отношение количества клеток в опыте к количеству клеток в контроле
+ простота метода
- нету белков межклеточного вещества
Прилипающие клетки
Отделяют от мембраны и подсчитывают
Фиксируют на мембране и подсчитывают
Хемотактический индекс вычисляют как отношение количества клеток в опыте к количеству клеток в контроле
+ простота метода
- нету белков межклеточного вещества
Слайд 4Метод миграции под агарозой
Клетки проходят по градиенту по границе дно –
агароза
После инкубации клетки фиксируют в геле, окрашивают и подсчитывают
Хемотактический индекс вычисляют как разница пройденного пути до лунки с хемоаттрактантом и пути до лунки с контролем
+ физиологичность
- трудоемкость
После инкубации клетки фиксируют в геле, окрашивают и подсчитывают
Хемотактический индекс вычисляют как разница пройденного пути до лунки с хемоаттрактантом и пути до лунки с контролем
+ физиологичность
- трудоемкость
Слайд 5Определение адгезивных свойств
Селектины – «качение» клеток по эндотелию
CD62L и CD62E
Интегрины –
плотное крепление к эндотелию
CD18, CD11a, CD11b и CD11c
CD18, CD11a, CD11b и CD11c
Слайд 6Определение адгезивных свойств
Использование моноклональных антител и дальнейший подсчет на проточном цитометре
или ИФА
Клетки метят радиоактивными метками и культивируют с эпителиальными клетками. После промывки измеряют радиоактивность
Окраска клеток прилипших к пластику и измерение оптической плотности. Существует линейная зависимость оптической плотности от количества прилипших клеток
Клетки метят радиоактивными метками и культивируют с эпителиальными клетками. После промывки измеряют радиоактивность
Окраска клеток прилипших к пластику и измерение оптической плотности. Существует линейная зависимость оптической плотности от количества прилипших клеток
Слайд 8Определение образования активных форм кислорода (АФК)
НСТ-тест (восстановление нитросинего тетразолия)
Измерения оптической плотности
после растворения диформазана
Микроскопический метод определения количества гранул
Проточная цитометрия
Индикатор АФК – дихлорофлуоресцеин диацетат
Активатор образования АФК – форбол 12-миристат 13-ацетат (ФМА)
Оценивают свечение до и после активации образования АФК
Хемилюменисценция
Микроскопический метод определения количества гранул
Проточная цитометрия
Индикатор АФК – дихлорофлуоресцеин диацетат
Активатор образования АФК – форбол 12-миристат 13-ацетат (ФМА)
Оценивают свечение до и после активации образования АФК
Хемилюменисценция
Слайд 9Определение дегрануляции нейтрофилов
Два типа гранул в нейтрофилах
Азурофильные (CD63)
Специфические (CD63b, CD67)
Нейтрофилы стимулируют
к дегрануляции
Добавляют МАТ к CD63 b CD66b с ФИТЦ - меткой
Определяют интенсивность средней флуоресценции. По этому параметру определяют экспрессию маркеров
Добавляют МАТ к CD63 b CD66b с ФИТЦ - меткой
Определяют интенсивность средней флуоресценции. По этому параметру определяют экспрессию маркеров
Слайд 10Определение АГ-представляющей функции фагоцитов
Смешанная лейкоцитарная реакция (СЛР)
АПК нагружают АГ и обрабатывают
митомицином или облучают
Культивируют с наивными Т-лимфоцитами
Определяют пролиферацию клеток либо продукцию цитокинов
Культивируют с наивными Т-лимфоцитами
Определяют пролиферацию клеток либо продукцию цитокинов
