- Главная
- Разное
- Дизайн
- Бизнес и предпринимательство
- Аналитика
- Образование
- Развлечения
- Красота и здоровье
- Финансы
- Государство
- Путешествия
- Спорт
- Недвижимость
- Армия
- Графика
- Культурология
- Еда и кулинария
- Лингвистика
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Маркетинг
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Histologická technika 2 презентация
Содержание
- 1. Histologická technika 2
- 3. Fyzikální metody fixace Vysoké teploty : varem,
- 4. Zmrazovací metody V histochemii výborné pro průkaz
- 5. Chemické metody = Fixační tekutiny Formol
- 6. Formol : je nejvíce používaný Je 40
- 7. Bakerova tekutina Složení: 10 % formol CaCl2 Voda Výborná fixační tekutina pro průkaz lipidů
- 8. 3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod. Znamená
- 9. Zalévání tkání Proč se tkáň musí zalít
- 10. Odvodnění a Intermedium Odvodnění se provede
- 11. Prosycení parafínem, Zalití Teplota
- 12. Zalévací komůrka Parafínové bločky
- 13. Další zalévací medium Celoidin / nitrát celulózy
- 14. Krájení řezů Mikrotom – přístroj k krájení
- 15. Odvodňovací automat (autotechnikon) Rotační Mikrotom Přístroje pro zpracování histologického materiálu
- 16. Rotační mikrotom Mikrotomové nože
- 17. Přilepení a napnutí parafínových řezů Elektricky vyhřívaná ploténka
- 18. Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetická Basická
- 20. Struktury, cytoplasma v buňkách 1/ basofilní /
- 21. Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma
- 22. Metoda Hematoxylin - Eosin Tato přehledná barvící
- 23. Barvení hematoxylinem - eosinem
- 24. Přehledné barvící metody 1/ Hematoxylin – eosin
- 26. Montování řezů Je ve skutečnosti přilepení krycího
- 27. Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené) B4
- 28. Jícen , H.E. , preparát . T 1
- 29. TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní
- 30. Weigert van Giesonova metoda Weigertův hematoxylin
- 31. azocarmine, anilínová modř, orange G AZAN
Fyzikální metody fixace Vysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané v histologii Nízké teploty : často využívané ,především v histochemii./ průkaz enzymů, lipidů / Zmrazovací metody
Слайд 3Fyzikální metody fixace
Vysoké teploty : varem, suché teplo
méně často využívané
v histologii
Nízké teploty : často využívané ,především
v histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /
Zmrazovací metody / freezing methods /
Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáně
za velmi nízkých teplot
Nízké teploty : často využívané ,především
v histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /
Zmrazovací metody / freezing methods /
Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáně
za velmi nízkých teplot
Слайд 4Zmrazovací metody
V histochemii výborné pro průkaz enzymů a lipidů (histochemie prokazuje
chemické
látky v buňkách).
Tekutý dusík,CO2,isopentan, heptan – látky
rychle zmrazí kousek
odebrané tkáně
Cryotechnika
/ přístroj : cryocut /
Výhoda: rychlost výsledků
Možnost využít
v průběhu operace
Tzv.peroperační
biopsie
látky v buňkách).
Tekutý dusík,CO2,isopentan, heptan – látky
rychle zmrazí kousek
odebrané tkáně
Cryotechnika
/ přístroj : cryocut /
Výhoda: rychlost výsledků
Možnost využít
v průběhu operace
Tzv.peroperační
biopsie
Слайд 5Chemické metody =
Fixační tekutiny
Formol
Bróm formol
Bakerova tekutina
Bouinova tekutina
Tekutiny se sublimátem:
Susa
Zenkerova tekutina
/
jodování /
100 % ethanol
Aceton
100 % ethanol
Aceton
Слайд 6Formol : je nejvíce používaný
Je 40 % roztok formaldehydu v vodě,
to
je 100 % formol.
Nutno naředit na 10 % roztok / tedy 4%
roztok formaldehydu /.
Kys. mravenčí / HCOOH / vzniká na světle,proto :
Láhev z tmavého skla a neutralizovat :
CaCO3 – 10% neutrální formol
Doba fixace : 24 – 48 hodin
Nutno naředit na 10 % roztok / tedy 4%
roztok formaldehydu /.
Kys. mravenčí / HCOOH / vzniká na světle,proto :
Láhev z tmavého skla a neutralizovat :
CaCO3 – 10% neutrální formol
Doba fixace : 24 – 48 hodin
Слайд 83/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.
Znamená podchladit si fixační tekutinu.
Např. Aceton
: je lepší fixační tekutinou
podchlazený na 0 – 4 st.Celsia.
Další fixační tekutiny – viz tabule - rotunda
podchlazený na 0 – 4 st.Celsia.
Další fixační tekutiny – viz tabule - rotunda
Слайд 9Zalévání tkání
Proč se tkáň musí zalít ?? Za účelem
zkrojení tkáně
na tenké řezy.
Nejpoužívanější médium je parafín
1/ Odvodnění
2/ Prosycení intermediem
3/ Prosycení parafínem
4/ Vlastní zalití
Nejpoužívanější médium je parafín
1/ Odvodnění
2/ Prosycení intermediem
3/ Prosycení parafínem
4/ Vlastní zalití
Слайд 10Odvodnění a Intermedium
Odvodnění se provede
vzestupnou řadou
alkoholů./30%,50%,70%,
80%,96%/
Nahradit vodu v
tkáních postupně až
100 % ethanolem.
Parafín je s vodou
nesmísitelné medium.
100 % ethanolem.
Parafín je s vodou
nesmísitelné medium.
Intermedium je látka
smísitelná s 100% alkoholem a zároveň se v ní rozpouští parafín.
Benzen,xylene,toluen.
Metylsalicylát,metylbenzoát.
Např. 3 lázně benzenu
po 15 minutách
Слайд 11Prosycení parafínem, Zalití
Teplota u parafínu:
56 – 58 st.Celsia.
3
lázně zkvalitněného
parafínu./+ včelí vosk /
Postupně se do tkáně
dostává parafín.
parafínu./+ včelí vosk /
Postupně se do tkáně
dostává parafín.
Zalévací komůrka
Teplota 56 – 58 st.C.
Přenést tkáň do parafínu.
Tvrzení / ochlazení /
parafínu.
Přitmelí se na dřevěný nosič
Výsledek : parafínový
bloček .
Слайд 13Další zalévací medium
Celoidin / nitrát celulózy rozpustný v alkohol éteru –
princip – odpaří se /.
Dobré zalévací medium pro tzv . tvrdé
tkáně / chrupavka, kost, zub /.
Výhoda : zalévá se při pokojové teplotě
Nevýhoda : zalévání trvá dlouho – několik
týdnů.
Zalévací média rozpustná ve vodě : želatina, vosky rozpustné ve vodě, umělé pryskyřice / glycolmetakrylát /,celodal / derivát močoviny /
Dobré zalévací medium pro tzv . tvrdé
tkáně / chrupavka, kost, zub /.
Výhoda : zalévá se při pokojové teplotě
Nevýhoda : zalévání trvá dlouho – několik
týdnů.
Zalévací média rozpustná ve vodě : želatina, vosky rozpustné ve vodě, umělé pryskyřice / glycolmetakrylát /,celodal / derivát močoviny /
Слайд 14Krájení řezů
Mikrotom – přístroj k krájení řezů
2 základní typy: sáňkový mikrotom
rotační mikrotom
Výsledek : ukrojený tenký řez / 5 – 10 um / z parafínového bločku a přenesený a přilepený na podložní sklo
/ směsí glycerol – bílek, poly – L - lysine /
Výsledek : ukrojený tenký řez / 5 – 10 um / z parafínového bločku a přenesený a přilepený na podložní sklo
/ směsí glycerol – bílek, poly – L - lysine /
Слайд 15Odvodňovací automat
(autotechnikon)
Rotační Mikrotom
Přístroje pro zpracování histologického materiálu
Слайд 18Barvení řezů
Barvivá : přírodní ,syntetická
Basická barviva :
Hematoxylin
Toluidinová modř
Thionin
Methylenová
violeť
Basický fuchsin
Methylénová modř
Basický fuchsin
Methylénová modř
Kyselá barviva:
Eosin
Anilínová modř
Světlá zeleň
Oranž G
Šafrán
Pikrofuchsin
Слайд 19 BARVENÍ
BASICKÁ (kationtová)
– kladný náboj na barevné části, reagují
s aniontovými skupinami struktur buněk a tkání
metylenová modř, toluidinová modř, thionin, (hematoxylin)
BASOFILIE, BASOFILNÍ STRUKTURA
KYSELÁ, ACIDICKÁ (aniontová) - záporný náboj na
barevné části barviva, reagují s kationtovými skupinami struktur
eosin, světlá zeleň, anilinová modř, pikrofuchsin, oranž G
ACIDOFILIE, EOSINOFILIE, OXYFILIE,
EOSINOFILNÍ STRUKTURA
s aniontovými skupinami struktur buněk a tkání
metylenová modř, toluidinová modř, thionin, (hematoxylin)
BASOFILIE, BASOFILNÍ STRUKTURA
KYSELÁ, ACIDICKÁ (aniontová) - záporný náboj na
barevné části barviva, reagují s kationtovými skupinami struktur
eosin, světlá zeleň, anilinová modř, pikrofuchsin, oranž G
ACIDOFILIE, EOSINOFILIE, OXYFILIE,
EOSINOFILNÍ STRUKTURA
Слайд 20Struktury, cytoplasma v buňkách
1/ basofilní / jádro/, ribosomy, GER: podmiňují basofilii
cytoplasmy
2/ eosinofilní / lysozomy, mitochondrie :
podmiňují eosinofilii cytoplasmy
3/ neutrofilní / granula – leukocyty /
2/ eosinofilní / lysozomy, mitochondrie :
podmiňují eosinofilii cytoplasmy
3/ neutrofilní / granula – leukocyty /
Слайд 22Metoda Hematoxylin - Eosin
Tato přehledná barvící metoda patří mezi nejpoužívanější
Viz –
tabule v rotundě
Слайд 24Přehledné barvící metody
1/ Hematoxylin – eosin
2/ žlutý trichróm
3/ zelený trichróm
4/ modrý
trichróm
5/ metoda AZAN
6/ metoda van Gieson
Viz obrazová tabule v rotundě
5/ metoda AZAN
6/ metoda van Gieson
Viz obrazová tabule v rotundě
Слайд 26Montování řezů
Je ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka na obarvený řez.
Montovací média
nerozpustná ve vodě
/např. kanadský balsám,Entalan, Solakryl/
Montovací média rozpustná ve vodě/např.Apáthyho sirup/
2 důležité požadavky na mont. médium:
průhlednost, a index lomu jako sklo/ 1,5 /
/např. kanadský balsám,Entalan, Solakryl/
Montovací média rozpustná ve vodě/např.Apáthyho sirup/
2 důležité požadavky na mont. médium:
průhlednost, a index lomu jako sklo/ 1,5 /
Слайд 30Weigert van Giesonova
metoda
Weigertův hematoxylin
pikrofuchsin
Jádra – hnědá
Kolagenní vlákna - červená
Cytoplasma, svaly
a erytro-
cyty se barví žlutě
cyty se barví žlutě
Hrot jazyka T3
Слайд 31 azocarmine, anilínová modř, orange G
AZAN
Sval - červený
Kolagenní vlákna - modrá
Jádra
- červená
Photomicrographs: Collection of ÚHIEM
ZJ
