Синтез ДНК через повреждение презентация

ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ 1957 г., Артур Корнберг, ДНК-полимераза I 1975 г., классификация 1990 г., новая номенклатура 2013 г., 19 ферментов (ДНК-зависимые ДНК-полимеразы) Структурная специфичность: A, B, C, D, X, Y, RT A, B,

Слайд 1СИНТЕЗ ДНК ЧЕРЕЗ ПОВРЕЖДЕНИЕ

TLS - translesion synthesis


Слайд 2ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
1957 г., Артур Корнберг, ДНК-полимераза I
1975 г., классификация
1990 г., новая номенклатура
2013

г., 19 ферментов (ДНК-зависимые ДНК-полимеразы)

Структурная специфичность: A, B, C, D, X, Y, RT

A, B, X, Y, RT

А, B: высокоточные репликативные и репаративные ДНК-полимеразы

Х: низкоточные репаративные ДНК-полимеразы

Y: низкоточные при копировании неповрежденной матрицы репаративные
ДНК-полимеразы


Слайд 43D-СТРУКТУРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
ДНК-полимераза фага RB69
(PDB-код 3QEP)
B-семейство
ДНК-полимераза β человека
(PDB-код 3QEP)
X-семейство
ДНК-полимераза

Dpo4
Sulfolobus solfataricus
(PDB-код 1JX4)
Y-семейство

ДНК-полимераза HIV-1 RT
ВИЧ
(PDB-код 2HMI)
RT-семейство

ДНК-полимераза Taq
Thermus aquaticus
(PDB-код 1TAQ)
А-семейство




Слайд 5"окисленные" основания
алкилированные основания
объемные аддукты
thymine glycol

[BP]-dA
t-s TT (CPD)
c-s TT (CPD)
(6-4)TT
Dewar TT
TT


Слайд 62D-СТРУКТУРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
"пальцы"
"ладонь"
"большой
палец"
"маленький
палец"


Слайд 7DNA
polymerase
processivity
factor
SSB
lesion
TLS patch
DNA
прокариоты (E.coli)
эукариоты (mammalian)
Pol III (C-семейство)
β-clamp
SSB/RecA
Pol δ/ε (В-семейство)
PCNA
RPA
Общая схема прохождения повреждения
репликативным

комплексом

?



Слайд 8


ПРОКАРИОТЫ
Pol I
Pol II
Pol III
Pol IV
Pol V
А-семейство
B-семейство
С-семейство
Y-семейство
Y-семейство
3'-5' exo
5'-3' exo
3'-5' exo
3'-5' exo
созревание

фрагментов Оказаки;
NER

индукция реактивации реплисомы;
NER, BER; TLS

репликация;
NER

TLS (N2-dG-аддукты,
алкилированные dN);
адаптивный мутагенез

TLS, SOS-репарация

DinA

DinB

UmuD'2
UmuC

ДНК-
полимераза

семейство

доп.
активности

основные функции

альтерн.
название


Слайд 9β-clamp
Pol V - UmuD’2C
Livneh Z. J. Biol. Chem. 2008. 283. 8274
Pol

III

β-clamp

SSB

RecA

SSB

Pol II

Pol IV

гомологичная
рекомбинация





β-clamp

β-clamp

Pol II

Pol IV



Pol V

dNTP pool concentration

5% 80% (stress)

95% 1% (stress)


всегда через ресинтез

Fuchs R. DNA Repair 2016. 44. 51


Слайд 10ЭУКАРИОТЫ
ДНК-зависимые ДНК-полимеразы
19 ферментов :
репликативные
ДНК-полимеразы
(α, δ, ε

- B-семейство)

15 ДНК-полимераз
(репликация и репарация)

митохондриальная
ДНК-полимераза
(γ – А-семейство)

A, B, -семейства

X, Y


Слайд 13репликативная
ДНК-полимераза
повреждение
выбор
TLS на лидирующей цепи


(REV1- зависимый
синтез специфической
ДНК-полимеразой)
TLS на отстающей цепи –
возникновение "gap"-структур

(PCNA-зависимый
синтез

специфической
ДНК-полимеразой)

PCNA

REV1

специфические
ДНК-полимеразы




RPA

RPA


Слайд 14pol 1

pol 2

TLS на отстающей цепи
TLS на лидирующей цепи
REV1


Слайд 152D-СТРУКТУРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
"пальцы"
"ладонь"
"большой
палец"
"маленький
палец"


Слайд 16пострепликативный TLS


Слайд 17DNA
polymerase
processivity
factor
SSB
lesion
TLS patch
DNA
прокариоты (E.coli)
эукариоты (mammalian)
Pol III (C-семейство)
β-clamp
SSB/RecA
Pol δ/ε (В-семейство)
PCNA
RPA
Общая схема прохождения повреждения
репликативным

комплексом

?



Слайд 18 1999 Zvi Livneh
совмещение двух подходов:

E.coli (in vitro,

in vivo)
H1299 (аденокарцинома легких)
Saos-2 (остеосаркома)
PC3 (карценома простаты)
Hep3B (гепатома)
XP-V - XP30RO, XP6DU (HEF)
MEF
лимфома Беркита
human U2OS cells (остеосаркома)

Методы изучения TLS

генетический подход -
обработка ДНК-пол дефицитных клеток ДНК-повреждающими агентами

биохимический подход -
использование поврежденных синтетических ДНК и рекомбинантных белков


Слайд 19pSKSL
~3 kb
gap:

10
20
30
350 (T7gp6exo)
antibio:

lesion

– kan
control – cm
intact – amp

Слайд 23Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Jul 14;106(28):11552-7.
DNA

polymerase zeta cooperates with polymerases kappa and iota in translesion DNA synthesis across pyrimidine photodimers in cells from XPV patients.
Ziv O, Geacintov N, Nakajima S, Yasui A, Livneh Z.

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика