- Главная
- Разное
- Дизайн
- Бизнес и предпринимательство
- Аналитика
- Образование
- Развлечения
- Красота и здоровье
- Финансы
- Государство
- Путешествия
- Спорт
- Недвижимость
- Армия
- Графика
- Культурология
- Еда и кулинария
- Лингвистика
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Маркетинг
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Регуляция везикулярного транспорта (Лекция 1) презентация
Содержание
- 1. Регуляция везикулярного транспорта (Лекция 1)
- 2. Транспорт макромолекул между клеточными компартментами
- 3. Press Release The Nobel Assembly at Karolinska
- 4. Везикулярный транспорт – это перенос макромолекул-грузов, «упакованных»
- 5. Компартмент: Имеет характерную морфологию, постоянный липидно-белковый состав,
- 6. Основные стадии транспортного процесса
- 8. Эндоцитозный путь: интернализация, рециклирование, трансцитоз, путь лизосомальной деградации Ретроградный путь
- 9. Эндоцитозный, или ретроградный путь – это путь
- 10. Биосинтетический и секреторный (или экзоцитозный) путь антероградный
- 11. Основная часть биосинтетического пути – от
- 12. В ходе везикулярного транспорта идет постоянный
- 14. Брефельдин А – блокирует транспорт из ЭПР
- 16. Брефельдин А – блокирует транспорт из ЭПР
- 17. Зачем нужен везикулярный транспорт? Обеспечение подвижности клетки
- 18. Суперсемейство малых ГТФаз
- 19. Специфическое взаимодействие с мембраной-мишенью (“tethering”) – первая
- 20. МЕТОДЫ Микроскопия (флуоресцентная, электронная) Фракционирование (дифференциальное, в
- 21. Генно-инженерные методы : мутантные формы белков
- 23. ФИ-3-киназа р85 отвечает на действие ЭФР, но
- 24. 15 мин после стимуляции эндоцитоза в клетках А431
- 25. Leica TCS SP5
- 26. 15 мин 30 мин 60 мин Проблема лимитов разрешения
- 27. МТ в фиксированых клетках МТ в живых клетках (альфа-тубулин-EGFP)
- 28. Электронная микроскопия: тонкая структура, но маленькое поле; артефакты при обработке N
- 30. 17% Перколл 33% Перколл
- 32. Total membranes ПМ Разделение органелл в градиенте Перколла с последующей ЕМ фракций
- 33. Степень ассоциации Rab7 c ПЭ коррелирует с эффективностью сортировки рецептора ЭФР
- 34. На поздних стадиях эндоцитоза области локализации Rab7
Слайд 1РЕГУЛЯЦИЯ ВЕЗИКУЛЯРНОГО ТРАНСПОРТА
Елена Сергеевна Корнилова
Лаборатория динамики внутриклеточных мембран
Институт цитологии РАН, С.-Петербург
Слайд 3Press Release
The Nobel Assembly at Karolinska Institutet
has today decided to
The 2013 Nobel Prize in Physiology or Medicine
for their discoveries of machinery regulating vesicle traffic, major transport system in our cells
The three Nobel Laureates have discovered the molecular principles that govern how this cargo is delivered to the right place at the right time in the cell.
jointly to James E. Rothman, Randy W. Schekman
and Thomas C. Südhof
Слайд 4Везикулярный транспорт – это перенос макромолекул-грузов, «упакованных» в мембранные пузырьки, или
Грузами могут быть как белки, так и липиды
В этом процессе участвуют все мембранные компартменты, кроме митохондрий
Слайд 5Компартмент:
Имеет характерную морфологию, постоянный липидно-белковый состав, выполняет набор определенных функций
существует
Транспортная везикула:
Несет груз, возникает на мембране компартмента-донора и исчезает после слияния с компартментом-мишенью
Слайд 6Основные стадии транспортного процесса
Мембрана-донор
Акцептор (мишень)
Сборка транспортной везикулы (budding)
транспортировка
нацеливание/узнавание/сближение/ заякоривание
(targeting/recognition/tethering/docking)
Слияние (fusion)
Рециклирование регуляторных
Белки окаймлений (COPI, II, клатрин-зависимые etc.)
Белки-грузы, рецепторы грузов
Регуляторные транспортные белки, обеспечивающие прохождение дальнейших стадий (Rab-белки)
МТ, актиновые структуры
3+4. Rab-белки и их эффекторы, NSF-SNAP-SNARE система
4
3
2
1
Слайд 8Эндоцитозный путь: интернализация, рециклирование, трансцитоз, путь лизосомальной деградации
Ретроградный путь
Слайд 9Эндоцитозный, или ретроградный путь – это путь от плазматической мембраны внутрь
Ранние эндосомы – основная сортирующая станция на эндоцитозном пути
Рециклирование (возврат на ПМ)
Переход в поздние эндосомы (вступление на путь лизосомной деградации)
фагоцитоз
трансцитоз
доставка в TGN
Слайд 10Биосинтетический и секреторный (или экзоцитозный) путь антероградный путь
Лиз
Лиз
Ядро
ЭПР
АГ
СГ
РЭ
ПЭ
Слайд 11Основная часть биосинтетического пути –
от ЭПР к цис-Гольджи, через цистерны
TGN – основная сортирующая станция на биосинтетическом пути
секреция
доставка на апикальную или базолатеральную ПМ
(экзоцитоз)
ранние и поздние эндосомы
лизосомы
другие органеллы
Слайд 12
В ходе везикулярного транспорта идет постоянный процесс сортировки компонентов мембран: т.наз.резидентные
пример: аппарат Гольджи
При огромном потоке синтезированных de novo белков, перемещающихся из цис-цистерн в транс-цистерны, сами цистерны сохраняют свою идентичность (т.е. определенный набор белков и липидов)
Слайд 14Брефельдин А – блокирует транспорт из ЭПР в Гольджи, не влияя
Слайд 16Брефельдин А – блокирует транспорт из ЭПР в Гольджи, не влияя
Sciaky et al., 1997, JBC 139 (5)
Brefeldin A GFP-GalTase in HeLA
В присутствии микротрубочек МТ разобраны Нокодазолом
Слайд 18Суперсемейство малых ГТФаз
Ras
Rab
Rho
Rac
ARF
Ran
Регулируют
разные
стадии
везикулярного
транспорта
сигналинг
Импорт в ядро
Слайд 19Специфическое взаимодействие с мембраной-мишенью (“tethering”) – первая стадия слияния мембран
или
стимуляция иных
Малые ГТФазы 20-30 kDa
низкая собственная скорость гидролиза ГТФ
Cell’s “top-managers”
Слайд 20МЕТОДЫ
Микроскопия (флуоресцентная, электронная)
Фракционирование (дифференциальное, в градиентах плотности
Биохимические методы
4. Системы in vitro
Методы системной биологии, моделирование
Слайд 21Генно-инженерные методы :
мутантные формы белков
Нокауты
siRNA
Флуоресцентные методы
Окраска антителами фиксированных клеток
конструкции «белок-GFP»
(Cy3 Alexa, QDs)
Слайд 23ФИ-3-киназа р85 отвечает на действие ЭФР, но не ко-локализуется с рецептор-содержащими
0 мин
15 мин
60 мин
90 мин
ЭФР-Р р85
Слайд 3017% Перколл
33% Перколл
Фракционирование:
Разделение поздних эндосом и лизосом при центрифугировании в градиенте
Слайд 34На поздних стадиях эндоцитоза области локализации Rab7 и активно сортирующегося рецептора
А431
EGFR Rab7
EGFR merge Rab7
10 мин
60 мин ЭФР
180 мин
30 мин
KN
CD126
WT
Слайд 35
контроль
ТФ-Р
ERD2
контроль
вортманнин
Вортманнин приводит к накоплению в околоядерной области укрупненных везикулярных структур
ЭФР-Р
Клетки А431
