Презентация на тему Культуры эукариотических клеток

Презентация на тему Культуры эукариотических клеток, предмет презентации: Биология. Этот материал содержит 53 слайдов. Красочные слайды и илюстрации помогут Вам заинтересовать свою аудиторию. Для просмотра воспользуйтесь проигрывателем, если материал оказался полезным для Вас - поделитесь им с друзьями с помощью социальных кнопок и добавьте наш сайт презентаций ThePresentation.ru в закладки!

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1
Текст слайда:

Культуры эукариотических клеток

Дитченко Татьяна Ивановна
Кафедра клеточной биологии и биоинженерии растений


Слайд 2
Текст слайда:

Лекции – 8 часов
Практические занятия – 4 часа Зачет


Слайд 3
Текст слайда:

In vitro – культивирование объектов «в стекле» (пробирке, колбе, биореакторе) на искусственных питательных средах в стерильных условиях

Культуры клеток – это клетки, растущие или сохраняющие жизнеспособность вне организма (в условиях in vitro)


Слайд 4
Текст слайда:

«В (на) живом» — внутри организма или на живом организме

«В пробирке» — вне живого организма


Слайд 5
Текст слайда:

Клеточные технологии включают:

культивирование растительных клеток;
культивирование животных клеток

Цель курса «Культуры эукариотических клеток» – знакомство с методами получения культур клеток, их ведения, а также практическим использованием этих объектов


Слайд 6
Текст слайда:

Главное требование – соблюдение строгой асептики

Все работы по получению культур растительных и животных клеток, их пересадкам производятся в ламинар-боксах


Слайд 7
Текст слайда:

Ламинар-боксы


Слайд 8
Текст слайда:

Второе условие – использование специальных питательных сред

Культуральная среда должна обеспечивать все внешние условия, которые клетки имели in vivo


Слайд 9
Текст слайда:

Способы культивирования растительных клеток

Поверхностное культивирование на плотной (агаризованной) питательной среде

Глубинное культивирование в жидкой питательной среде

Каллусные культуры

Суспензионные культуры


Слайд 10
Текст слайда:

Каллус (от лат. callus — толстая кожа, мозоль)


Слайд 11
Текст слайда:

Каллус - недифференцированные растительные клетки, выращиваемые поверхностным способом на полутвердой питательной среде


Слайд 12
Текст слайда:

Каллус может образоваться не только в искусственных условиях, но и в природе, например, на раневой поверхности. Каллусная ткань способствует зарастанию ран, срастанию прививок и служит для восстановления (регенерации) утраченных органов


Слайд 13
Текст слайда:

1. Выбор экспланта

Эксплант - фрагмент ткани или органа, используемый для получения первичного каллуса


Слайд 14
Текст слайда:

Каллусы однодольных растений обычно получают из зародышей, корней, отрезков основания стебля

Каллусы двудольных растений могут быть получены практически из любых органов (отрезков стеблей и корней, мезофилла листа, органов цветка)


Слайд 15
Текст слайда:

Лучшими эксплантами для получения каллуса являются:
молодая ткань;
ткань ответственная за пролиферацию (меристема)

Нежелательно использовать:
одревесневшие ткани;
старые ткани с низким уровнем метаболизма;
плохо пролиферирующие ткани (напр., мякоть плодов);
ткани, покрытые восками, суберином и т.п.


Слайд 16
Текст слайда:

Проращивание простерилизованных семян в асептических условиях дает наиболее пригодный материал для получения каллусов


Слайд 17
Текст слайда:

2. Стерилизация растительного материала

На поверхности органов растений всегда находится эпифитная микрофлора. Эксплант должен быть освобожден от всех видов микроорганизмов (бактерий, грибов, микоплазм и т.д.). Поверхностная стерилизация освобождает эксплант от наружной инфекции.


Слайд 18
Текст слайда:

АНТИСЕПТИКИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ РАСТИТЕЛЬНЫХ ТКАНЕЙ:


соединения, содержащие активный хлор, – 0,5-1% (гипохлорит кальция, гипохлорит натрия, хлорная известь, хлорамин);

двухлористая ртуть (сулема), 0,1-1 %-ный раствор;

формалин, 5%-ный раствор;

перекись водорода, 10-20%-ный раствор;

этиловый спирт, 70%-ный раствор;

фенол, 5%-ный раствор;

антибиотики (в случае внутренней инфекции)


Слайд 19
Текст слайда:

ТЕХНИКА ПРОВЕДЕНИЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ РАСТИТЕЛЬНОГО МАТЕРИАЛА:

Предварительная стерилизация
(проводят очистку поверхности путем ее промывания проточной водой; обработки этанолом (70%-ный раствор в течение 1 мин), растворами CuSO4 либо KMnO4)

2) Стерилизация
(в условиях ламинар-бокса предварительно простерилизованные ткани помещают в стерилизующий раствор)

3) Постстерилизация
(растительный материал отмывают от стерилизующего агента 3-4 порциями стерильной дистиллированной воды)


Слайд 20
Текст слайда:

3. Перенос стерильных эксплантов на питательную среду


Слайд 21
Текст слайда:

4. Получение первичного каллуса

Образование каллуса, в первую очередь, отмечается на раневой поверхности экспланта


Слайд 22
Текст слайда:

При оптимально подобранной среде первичные каллусы в количестве достаточном для пересадки образуются в течение 3-8 недель в зависимости от вида растения


Слайд 23
Текст слайда:

5. Субкультивирование (пассирование)

Первичный каллус разделяют на части, которые в дальнейшем культивируются отдельно. Следует обратить внимание на размеры трансплантов, переносимых на свежую питательную среду: если они слишком малы, то дальнейший рост каллуса может быть угнетен.


Слайд 24
Текст слайда:

Каллусные культуры различаются по:

интенсивности роста;
окраске;
консистенции и др.

Типы каллусных культур:


Слайд 25
Текст слайда:

Типы каллусных культур:

рыхлые
(легко распадаются на отдельные клетки);

среднеплотные
(клетки могут быть отделены друг от друга сильным встряхиванием);

плотные
(клетки очень мелкие, не отделяются взбалтыванием)


Слайд 26
Текст слайда:

Направления использования каллусных культур:

изучение процессов цитодифференцировки и морфогенеза;
биохимические и молекулярно-биологические исследования;
изучение механизмов опухолеобразования;
получение суспензионных культур;
регенерация растений, получение новых форм растений;
сохранение в растущем состоянии коллекций разных видов растений


Слайд 27
Текст слайда:

Суспензионная культура – отдельные клетки или клеточные агрегаты, выращиваемые в жидкой питательной среде во взвешенном состоянии


Слайд 28
Текст слайда:

Необходимое условие для поддержания суспензионных культур – постоянное перемешивание питательной среды


Слайд 29
Текст слайда:

удобная модель для молекулярно-биологических и биохимических исследований;
(клетки в одинаковой степени доступны для внешнего воздействия, более «открыты»);

возможность быстрого набора биомассы для получения БАВ;


простота процессов субкультивирования
(легко заменить или отобрать питательную среду)


ОСНОВНЫЕ ПРЕИМУЩЕСТВА СУСПЕНЗИОННЫХ КУЛЬТУР:


Слайд 30
Текст слайда:

1. Отбор хорошо растущей каллусной культуры рыхлого типа

2. Инициализация первичной суспензии
2-3 г свежей массы каллусной ткани на 60-100 мл жидкой питательной среды.

3. Культивирование
Колбы помещают на качалку, скорость вращения которой составляет 100-120 об/мин.
Процесс получения первичной суспензии занимает 2-3 недели.

ЭТАПЫ ПОЛУЧЕНИЯ:


Слайд 31
Текст слайда:

Суспензионные культуры состоят из:

отдельных клеток;

клеточных групп (2-10 клеток);

многоклеточных агрегатов (сотни и тысячи клеток).


Слайд 32
Текст слайда:

А

В

С

С


Слайд 33
Текст слайда:

слабоагрегированные;
(состоят из одиночных клеток (40%) и мелких агрегатов (60%), агрегаты не должны содержать более 10-12 клеток)

среднеагрегированные;
(состоят из одиночных клеток (40%), мелких агрегатов (40%) и крупных агрегатов (20%))

высокоагрегированные;
(состоят из мелких (40%) и крупных агрегатов (60%)


ТИПЫ СУСПЕНЗИОННЫХ КУЛЬТУР:
(в зависимости от степени агрегированности)


Слайд 34
Текст слайда:

КУЛЬТУРЫ ПРОТОПЛАСТОВ


Слайд 35
Текст слайда:

Протопласт – это живое содержимое растительной клетки, лишенное клеточной стенки


Слайд 36
Текст слайда:

ИСТОЧНИКИ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТОПЛАСТОВ:

изолированные органы растений и их части (листья, корни, лепестки);

суспензионная культура;

каллусная ткань.


Слайд 37
Текст слайда:

Основан на механическом разрезании клеточной стенки у клеток в плазмолизированном состоянии


Основан на разрушении клеточной стенки с помощью ферментов

Клеркер (1892)

Кокинг (1960)


Слайд 38
Текст слайда:

МЕХАНИЧЕСКИЙ МЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТОПЛАСТОВ


Слайд 39
Текст слайда:

Плазмолиз – явление отделения протопласта растительной клетки от клеточной стенки в гипертонической среде


Слайд 40
Текст слайда:

Схема строения растительной клеточной стенки


Слайд 41
Текст слайда:

На практике часто используются ферментные препараты, включающие комплекс из нескольких гидролитических ферментов

Состав ферментативной смеси должен наиболее полно соответствовать составу клеточной стенки!


Слайд 42
Текст слайда:

Основные компоненты питательных сред для культивирования растительных клеток:

макроэлементы;
микроэлементы;
источник углерода;
витамины;
регуляторы роста


Слайд 43
Текст слайда:

РЕГУЛЯТОРЫ РОСТА РАСТЕНИЙ

Содержание регуляторов роста является определяющим фактором для успешного роста культур клеток растений

АУКСИНЫ
ЦИТОКИНИНЫ


Слайд 44
Текст слайда:

АУКСИНЫ

β-индолил-3-уксусная кислота (ИУК)
β-индолил-3-масляная кислота (ИМК)
α-нафтилуксусная кислота (НУК)
2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-Д)



Слайд 45
Текст слайда:

АУКСИНЫ НЕОБХОДИМЫ ДЛЯ:

стимуляции деления и растяжения клеток каллусных и суспензионных культур;

стимуляции образования корней (ризогенеза);

в сочетании с другими фитогормонами для формирования у протопластов клеточных стенок




Слайд 46
Текст слайда:

Стимуляция закладки корней (ризогенеза) у черенков под действием ауксинов



Слайд 47
Текст слайда:

ИУК способна легко окисляться клетками растений.
Ее редко добавляют в среду для культивирования в качестве единственного ауксина

Синтетические ауксины (2,4-Д, НУК) обладают более высокой биологической активностью по сравнению с природными (ИУК, ИМК)

Например, ИУК в 300 раз менее активна, чем 2,4-Д и в 30 раз менее активна, чем НУК


Слайд 48
Текст слайда:

ЦИТОКИНИНЫ

Зеатин
Изопентениладенин (ИПА)
6-фурфуриладенин (кинетин)
6-бензиламинопурин (6-БАП)



Слайд 49
Текст слайда:

Зеатин термолабилен, поэтому его нельзя автоклавировать


Слайд 50
Текст слайда:

ЦИТОКИНИНЫ ВКЛЮЧАЮТ В СОСТАВ СРЕД ДЛЯ:

стимуляции клеточных делений в каллусных и суспензионных культурах, в культурах протопластов;

образования побегов (стеблевой морфогенез)


Слайд 51
Текст слайда:

ФИЗИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ:

условия освещения;
Каллусные культуры и клеточные суспензии выращиваются либо темноте, либо под лампами белого света.

температура;
Для большинства культур поддерживается в термостатах на уровне 26±1°С.

условия аэрации;
Важны для суспензионных культур. Зависят от эффективности перемешивания питательной среды и подачи стерильного воздуха (в случае культивирования в биореакторах).

влажность воздуха
В культуральной комнате должна составлять 60–70 %


Слайд 52
Текст слайда:

Ростовой цикл каллусных и суспензионных культур


Слайд 53
Текст слайда:

1- лаг-фаза; 2 - экспоненциальная; 3 - линейная; 4 - фаза замедленного роста; 5 - стационарная фаза; 6 - фаза деградации клеток

Ростовой цикл, или цикл выращивания, – это период от помещения транспланта/инокулюма на свежую питательную среду до следующей пересадки.


Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика