Эмбриоселекция презентация

Содержание

1 Методы вымывания и пересадки эмбрионов

Слайд 1Лекция 5. Эмбриоселекция
Содержание:

1. Методы вымывания и пересадки эмбрионов…..

2. Эмбриоселекция: понятие и

основные направления…………………………………………






Слайд 21 Методы вымывания и пересадки эмбрионов




Слайд 3Классификация методов извлечения эмбрионов
После забоя донора
Хирургические – использование

техники хирургической операции для доступа в полость матки

Нехирургический – доступ к матке через естественный половой тракт с помощью специальных инструментов и манипуляций





Слайд 4Хирургические методы
Лапоротомия в области голодной ямки






Слайд 5Хирургические методы
Лапоротомия белой линии живота




Слайд 6



Извлечение эмбрионов из матки


Лигатура
Игла шприца




Слайд 7Нехирургический метод




Слайд 8Нехирургический метод




Слайд 10Тренажер для обучения ректальному исследованию




Слайд 12Методы пересадки эмбрионов
Хирургические
Нехирургический




Слайд 13Сравнительный анализ методов вымывания и пересадки
Хирургический:
универсальный
травматизм донора
требования к

квалификации персонала
низкие потери эмбрионов

Нехирургический:
применим только на крупных животных
низкий риск травматизма
относительная легкость при выполнении
возможны потери эмбриоонов в ходе
вымывания





Слайд 142 Эмбриоселекция: понятие и основные направления




Слайд 15Основные направления эмбриоселекции
Отбор по жизнеспособности (качеству) эмбриона
Разделение эмбрионов по полу
Диагностика генетических

аномалий

Эмбриоселекция – совокупность методов, направленных на оценку и отбор эмбрионов с нужными свойствами.





Слайд 161. Методы оценки качества эмбрионов
Индифферентные – не оказывают никакого влияния на

жизнеспособность эмбриона

Относительно индифферентные – оказывают незначительное влияние на жизнеспособность эмбриона

Жесткие – оказывают значительное воздействие на жизнеспособность эмбриона





Слайд 171.1.Индифферентные (безразличные) методы
Морфологическая оценка качества – основана на визуальной оценке

строения и состояния всех частей эмбриона, а также на соответствии стадии развития эмбриона его возрасту.

проводится при микроскопировании с увеличением 100 – 120 ×
эмбрионы оцениваются по 5-ти балльной шкале:
- отличные – 5 баллов
- хорошие – 4 балла
- удовлетворительные – 3 балла
- условно годные – 2 балла
- непригодные – 1 балл





Слайд 18


Поиск эмбрионов (20×)
Оценка качества эмбриона (100×)
с. Верх-Ирмень, 1993 г.

Поиск и оценка

эмбрионов проводится в стерильном боксе при температуре 300.





Слайд 19Отличные эмбрионы (5 баллов)





А
С
В
А
С
В
- клетки правильной округлой формы, тесно сцеплены друг

с другом (компактизация) перивителлиновое пространство прозрачное, ZP без повреждений





Слайд 20Отличные эмбрионы (5 баллов)




Слайд 21Хорошие эмбрионы (4 балла)




- клетки неодинакового размера, расположены несимметрично.




Слайд 22Хорошие эмбрионы (4 балла)




Слайд 23

Удовлетвортельные эмбрионы (3 балла)

- единичное разрушение клеток, «частичный зародыш», включения в

перивителлиновом пространстеве.











Слайд 24Удовлетвортельные эмбрионы (3 балла)




Слайд 25Условно годные эмбрионы (2 балла)





- деформация прозрачной оболочки, частичное разрушение бластомеров

разрушение связи между ними, фрагментация цитоплазмы.





Слайд 26Условно годные эмбрионы (2 балла)




Слайд 27Непригодные эмбрионы (1 балл)
- значительное повреждение клеток, прозрачной оболочки, несоответствие строения

эмбрионов его возрасту





Слайд 28Непригодные эмбрионы (1 балл)
Для пересадки используют эмбрионы отличного, хорошего и удовлетворительного

качества (5, 4 и 3 б.). Условно годные эмбрионы подвергаются культивированию.





Слайд 291.2. Относительно индифферентные методы
Прижизненное (витальное) окрашивание – основано на использовании

красителей, избирательно реагирующих с живыми и мертвыми клетками

Метод регистрации биопотенциалов – измерение напряжения электрического поля эмбриона

Изотопный контроль биохимических процессов – контроль за изменением радиоактивности среды при распаде С14-глюкозы в среде с эмрионом на пируват и лактат





Слайд 30 Прижизненное витальное окрашивание


Акридиноранж
1:40 000
Красный цвет - живые
Зеленый цвет - мертвые




Слайд 31 Регистрация биопотенциалов
U = 40 – 60 мВ - живые
U =

0 мВ - мертвые






Слайд 321.3. Жесткие методы
Культивирование – подержание жизнеспособности эмбриона с целью выяснения

его жизнеспособности

Криоконсервация – замораживание эмбрионов в жидком азоте (при -1960С) с целью длительного хранения





Слайд 33В искусственных условиях (in vitro) – проводится в специальных газопроточных термостатах

при температуре 370С и в газовой среде из 90% СО2, 5%О2 и 5%N2

Культивирование эмбрионов





Слайд 34 Культивирование эмбрионов
В промежуточных реципиентах (in vivo)

Гелевый цилиндр
Промежуточный реципиент




Время культивирования составляет

24 – 48 ч.
После культивирования эмбрионы вновь подвергают морфологической оценке качества.
Пригодными считаются эмбрионы, оцененные на 5, 4 и 3 балла.





Слайд 35 Криоконсервация эмбрионов - вынужденный метод оценки качества. Процедуру замораживания и

оттаивания могут выдержать только жизнеспособные эмбрионы. Для криоконсервации отбираются эмбрионы только отличного и хорошего качества.





Слайд 362. Методы определения пола эмбрионов
Цитогенетический – оценка кариотипа (хромосомного набора) по

половым хромосомам в ядрах клеток эмбриона

Иммунологический – выявление Н-Y- антигена, синтезирующегося в клетках мужских эмбрионов

Молекулярно-генетический – определение последовательностей ДНК, маркирующих пол





Слайд 37
Цитогенетический метод
1. Микробиопсия клеток эмбриона





Кювета для культивирования




Слайд 383. Остановка деления клеток колхицином на стадии метафазы (хромосомы спирализуются и

укорачиваются)



2. Культивирование клеток эмбриона




Колхицин





Слайд 393. Приготовление хромосомных препаратов





Предметное стекло
Гипотонический раствор цитрата натрия (1%)
Фиксация: метиловый спирт

+ ледяная уксусная кислота

Окраска препаратов






Слайд 405. Микроскопия хромосомных препаратов
































































Слайд 41Цитогенетический анализ:
определение пола;
выявление хромосомных мутаций (трисомия, моносомия);
выявление геномных

мутаций (полиплоидия, анеуплоидия);
оценка хромосомной нестабильности (разрывы хромосом).





Слайд 42FISH-метод (fluorescent in-situ hybridization) идентификации половых хромосом – выявление локализации хромосом

с помощью фрагмента ДНК с флуоресцентной меткой, гомологичного участку искомой хромосомы.





Слайд 43
Иммунологический метод

Антитела
Антитела
На поверхности клеток эмбрионов мужского пола синтезируются специфический белок (Н-Y-антиген),

ген которого находится в Y-хромосоме.
Для выявления антигена в среду с эмбрионами добавляют флуоресцирующие антитела к Н-Y-антигену.





Слайд 44Молекулярно-генетические методы

Амелогенин – белок, образующий структурный матрикс зубной эмали
У человека ген

амелогенина (AMG) – белка, образующего структурный матрикс зубной эмали, локализован в половых хромосомах Х и Y.
Аллель AMGX, расположенный в Х-хромосоме, на 6 нуклеотидов короче, в результате делеции первого интрона гена.
При идентификации пола, определяются фрагменты обоих аллелей длиной, соответственно, 112 (АМGY) и 106 (AMGX ) пар нуклеотидов.





Слайд 45




Различия в аллелях гена амелогенина человека
Х-хромосома
Y-хромосома



Aллель AMGX – 106 п.н.
Aллель

AMGY – 112 п.н.








Слайд 46
Технология определения пола











Микробиопсия
Выделение ДНК
Электрофорез фрагментов ДНК половых хромосом
1

2 3 4

112

106









Слайд 47









Олень
Олень
Овца
Аллель AMG X
Аллель AMG Y




Слайд 48Диагностика генетических аномалий (преимплантационная генетическая диагностика) – комплекс методов, направленных на

выявление эмбрионов с генетическими нарушениями с целью предотвращения рождения неполноценных (больных) особей.

Цитогенетические методы

Молекулярно-генетичекие методы





Слайд 49Конец



Обратная связь

Если не удалось найти и скачать презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое ThePresentation.ru?

Это сайт презентаций, докладов, проектов, шаблонов в формате PowerPoint. Мы помогаем школьникам, студентам, учителям, преподавателям хранить и обмениваться учебными материалами с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика