Бактериология. Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы её изучения презентация

методы её изучения.

Преподаватель: Лень Т.А.

Порядки: собственно бактерии, актиномицеты, спирохеты, хламидии.
II Класс – риккетсии.
III Класс – мягкокожие (архебактерии) – микоплазмы.
IV особое царство – вирусы.

бактерии, образующие грибницу.
Спирохеты – тонкие, длинные, извитые (спиралевидные формы) бактерии, подвижные при «сгибательном» изменении клеток.
Хламидии (гальпровии) – обязательные внутриклеточные нитевидной или шарообразной формы грам «-» бактерии, энергетические паразиты живых клеток.
Риккетсии – самые мелкие грам «-» палочковидные бактерии (0,35 – 1 мкм), обязательные внутриклеточные паразиты членистоногих.
Микоплазмы – мелкие бактерии,
окружённые ЦПМ и не имеющие
клеточной стенки

белоксинтезирующей системы, содержат ДНК или РНК.
Прионы – безнуклеиновые инфекционные частицы, представленные белками.
Бактерии – одноклеточные микроорганизмы, морфологически отличающиеся друг от друга по величине, расположению и форме отдельных клеток, они лишены хлорофилла и размножаются простым делением.
Большинство бактерий – сапрофиты, но имеется и группа патогенных видов, вызывающих заболевания у человека, животных и растений – паразиты.

Нитевидные.

расположены в одиночку. Входят в состав нормальной микрофлоры, находятся во внешней среде. Заболеваний у людей не вызывают.

2.Диплококки. Деление этих микроорганизмов происходит в одной плоскости, образуются пары клеток. Среди диплококков много патогенных микроорганизмов- гонококк, менингококк, пневмококк.


3.Стрептококки. Деление осуществляется в одной плоскости, размножающиеся клетки сохраняют связь (не расходятся), образуя цепочки. Много патогенных микроорганизмов- возбудители ангин, скарлатины, гнойных воспалительных процессов.
 

четыре клетки). Медицинского значения не имеют.


5.Сарцины. Деление в трех взаимоперпендикулярных плоскостях, образуя тюки (пакеты) из 8, 16 и большего количества клеток. Часто обнаруживают в воздухе.
 

6.Стафилококки (от лат.- гроздь винограда). Делятся беспорядочно в различных плоскостях, образуя скопления, напоминающие грозди винограда. Вызывают многочисленные болезни, прежде всего гнойно- воспалительные.

СПОРЫ ОБЫЧНО НЕ ПРЕВЫШАЕТ РАЗМЕРА (“ШИРИНЫ”) КЛЕТКИ (ЭНДОСПОРЫ).   3.КЛОСТРИДИИ- АНАЭРОБНЫЕ СПОРООБРАЗУЮЩИЕ МИКРОБЫ. ДИАМЕТР СПОРЫ БОЛЬШЕ ПОПЕРЕЧНИКА (ДИАМЕТРА) ВЕГЕТАТИВНОЙ КЛЕТКИ, В СВЯЗИ С ЧЕМ КЛЕТКА НАПОМИНАЕТ ВЕРЕТЕНО ИЛИ ТЕННИСНУЮ РАКЕТКУ

ЗАПЯТОЙ, КОРОТКОГО ЗАВИТКА. 2. СПИРИЛЛЫ- ИМЕЮТ 2- 3 ЗАВИТКА.  3. СПИРОХЕТЫ- ИМЕЮТ РАЗЛИЧНОЕ ЧИСЛО ЗАВИТКОВ, АКСОСТИЛЬ- СОВОКУПНОСТЬ ФИБРИЛЛ, СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ДЛЯ РАЗЛИЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ХАРАКТЕР ДВИЖЕНИЯ И ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ (ОСОБЕННО КОНЦЕВЫХ УЧАСТКОВ). ИЗ БОЛЬШОГО ЧИСЛА СПИРОХЕТ НАИБОЛЬШЕЕ МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИМЕЮТ ПРЕДСТАВИТЕЛИ ТРЕХ РОДОВ- BORRELIA, TREPONEMA, LEPTOSPIRA.

Извитые формы микроорганизмов.

ОДНОЙ ХРОМОСОМОЙ КОЛЬЦЕВИДНОЙ ФОРМЫ. СОСТОИТ ИЗ ДВУХЦЕПОЧЕЧНОЙ НИТИ ДНК. НУКЛЕОИД НЕ ОТДЕЛЕН ОТ ЦИТОПЛАЗМЫ ЯДЕРНОЙ МЕМБРАНОЙ.   2.ЦИТОПЛАЗМА- СЛОЖНАЯ КОЛЛОИДНАЯ СИСТЕМА, СОДЕРЖАЩАЯ РАЗЛИЧНЫЕ ВКЛЮЧЕНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ (ЗЕРНА ВОЛЮТИНА, ГЛИКОГЕНА, ГРАНУЛЕЗЫ И ДР.), РИБОСОМЫ И ДРУГИЕ ЭЛЕМЕНТЫ БЕЛОКСИНТЕЗИРУЮЩЕЙ СИСТЕМЫ, ПЛАЗМИДЫ (ВНЕНУКЛЕОИДНОЕ ДНК), МЕЗОСОМЫ (ОБРАЗУЮТСЯ В РЕЗУЛЬТАТЕ ИНВАГИНАЦИИ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ В ЦИТОПЛАЗМУ, УЧАСТВУЮТ В ЭНЕРГЕТИЧЕСКОМ ОБМЕНЕ, СПОРООБРАЗОВАНИИ, ФОРМИРОВАНИИ МЕЖКЛЕТОЧНОЙ ПЕРЕГОРОДКИ ПРИ ДЕЛЕНИИ).  

Обязательными органоидами являются: ядерный аппарат, цитоплазма, цитоплазматическая мембрана.

ВЫПОЛНЯЕТ РЯД ВАЖНЕЙШИХ ФУНКЦИЙ- БАРЬЕРНУЮ (СОЗДАЕТ И ПОДДЕРЖИВАЕТ ОСМОТИЧЕСКОЕ ДАВЛЕНИЕ), ЭНЕРГЕТИЧЕСКУЮ (СОДЕРЖИТ МНОГИЕ ФЕРМЕНТНЫЕ СИСТЕМЫ- ДЫХАТЕЛЬНЫЕ, ОКИСЛИТЕЛЬНО- ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ, ОСУЩЕСТВЛЯЕТ ПЕРЕНОС ЭЛЕКТРОНОВ), ТРАНСПОРТНУЮ (ПЕРЕНОС РАЗЛИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ В КЛЕТКУ И ИЗ КЛЕТКИ).  4.КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА- ПРИСУЩА БОЛЬШИНСТВУ БАКТЕРИЙ (КРОМЕ МИКОПЛАЗМ, АХОЛЕПЛАЗМ И НЕКОТОРЫХ ДРУГИХ НЕ ИМЕЮЩИХ ИСТИННОЙ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ МИКРООРГАНИЗМОВ). ОНА ОБЛАДАЕТ РЯДОМ ФУНКЦИЙ, ПРЕЖДЕ ВСЕГО ОБЕСПЕЧИВАЕТ МЕХАНИЧЕСКУЮ ЗАЩИТУ И ПОСТОЯННУЮ ФОРМУ КЛЕТОК, С ЕЕ НАЛИЧИЕМ В ЗНАЧИТЕЛЬНОЙ СТЕПЕНИ СВЯЗАНЫ АНТИГЕННЫЕ СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ. В СОСТАВЕ – ДВА ОСНОВНЫХ СЛОЯ, ИЗ КОТОРЫХ НАРУЖНЫЙ- БОЛЕЕ ПЛАСТИЧНЫЙ, ВНУТРЕННИЙ- РИГИДНЫЙ.

МИКРОВОРСИНКИ. КАПСУЛА ИЛИ СЛИЗИСТЫЙ СЛОЙ ОКРУЖАЕТ ОБОЛОЧКУ РЯДА БАКТЕРИЙ. ВЫДЕЛЯЮТ МИКРОКАПСУЛУ, ВЫЯВЛЯЕМУЮ ПРИ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ В ВИДЕ СЛОЯ МИКРОФИБРИЛЛ, И МАКРОКАПСУЛУ, ОБНАРУЖИВАЕМУЮ ПРИ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ. КАПСУЛА ЯВЛЯЕТСЯ ЗАЩИТНОЙ СТРУКТУРОЙ.   ЖГУТИКИ. ПОДВИЖНЫЕ БАКТЕРИИ МОГУТ БЫТЬ СКОЛЬЗЯЩИЕ (ПЕРЕДВИГАЮТСЯ ПО ТВЕРДОЙ ПОВЕРХНОСТИ В РЕЗУЛЬТАТЕ ВОЛНООБРАЗНЫХ СОКРАЩЕНИЙ) ИЛИ ПЛАВАЮЩИЕ, ПЕРЕДВИГАЮЩИЕСЯ ЗА СЧЕТ НИТЕВИДНЫХ СПИРАЛЬНО ИЗОГНУТЫХ БЕЛКОВЫХ (ФЛАГЕЛЛИНОВЫХ ПО ХИМИЧЕСКОМУ СОСТАВУ) ОБРАЗОВАНИЙ- ЖГУТИКОВ.

ЖГУТИКИ ПО ДИАМЕТРАЛЬНО ПРОТИВОПОЛОЖНЫМ ПОЛЮСАМ. D.ПЕРИТРИХИ- ИМЕЮТ ЖГУТИКИ ПО ВСЕМУ ПЕРИМЕТРУ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ.

По расположению и количеству жгутиков выделяют ряд форм бактерий.

КЛЕТКУ, С ПОМОЩЬЮ КОТОРЫХ БАКТЕРИИ ПРОКРЕПЛЯЮТСЯ К СУБСТРАТАМ (НАПРИМЕР, К ПОВЕРХНОСТИ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК). F- ПИЛИ (ФАКТОР ФЕРТИЛЬНОСТИ) – АППАРАТ КОНЪЮГАЦИИ БАКТЕРИЙ, ВСТРЕЧАЮТСЯ В НЕБОЛЬШОМ КОЛИЧЕСТВЕ В ВИДЕ ТОНКИХ БЕЛКОВЫХ ВОРСИНОК.

СОСТОЯНИЕ ПОКОЯ. КЛЕТКА ТЕРЯЕТ ВОДУ, НЕСКОЛЬКО СМОРЩИВАЕТСЯ И ОСТАЕТСЯ В СОСТОЯНИИ ПОКОЯ ДО ТЕХ ПОР, ПОКА СНОВА НЕ ПОЯВИТСЯ ВОДА. НЕКОТОРЫЕ ВИДЫ ПЕРЕЖИВАЮТ ПЕРИОДЫ ЗАСУХИ, ЖАРЫ ИЛИ ХОЛОДА В ФОРМЕ СПОР. ОБРАЗОВАНИЕ СПОР У БАКТЕРИЙ - ЭТО НЕ СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ, ТАК КАК КАЖДАЯ КЛЕТКА ДАЕТ ВСЕГО ОДНУ СПОРУ И ОБЩЕЕ КОЛИЧЕСТВО ОСОБЕЙ ПРИ ЭТОМ НЕ ВОЗРАСТАЕТ.

В ЦИТОПЛАЗМЕ, ПРЕДСТАВЛЯЮТ СОБОЙ КЛЕТКИ С НИЗКОЙ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ВЫСОКОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ (РЕЗИСТЕНТНОСТЬЮ) К ВЫСУШИВАНИЮ, ДЕЙСТВИЮ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ, ВЫСОКОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ И ДРУГИХ НЕБЛАГОПЛИЯТНЫХ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ.

один краситель. При сложном методе окраски – два и более красителей.
Перед окраской препарата мазок высушивают и фиксируют.
Датский учёный-бактериолог Грам Ганс Христиан Иоахим (1853–1938), занимался систематизацией бактерий. Он показал, что одни бактерии имеют толстую клеточную стенку, другие — тонкую за счёт её разного строения. Такое строение характерно для каждого вида. Грам придумал как узнать, какая клеточная стенка у изучаемых клеток (бактерий) — этот метод назвали методом Грама

микроба при изучении морфологии, подвижности, тинкториальности, ферментативной активности. Она очень важна при диагн-ке болезней

иммерсионных объективов является то, что между фронтальной линзой такого объектива и препаратом помещают иммерсионную жидкость, имеющую показатель преломления такой же, как стекло (или близкий к нему), что обеспечивает увеличение числовой апертуры и разрешающей способности объектива.

среде

Рост на плотной питательной среде:
1 – расположение колонии (плоское или выпуклое),
2 – форма и размеры колонии,
3 – края колонии,
4 – характер поверхности и прозрачность.

капсул, жгутиков

Визуализация морфологических изменений бактериальных клеток

Витальная (прижизненная) окраска позволяет установить подвижность, отдифференцировать живые и мертвые клетки.

Биохимические свойства бактерий - при которых образуются определённые вещества и выделенная культура не расщепляет глюкозу, а расщепляет сахарозу. Протеолитические свойства бактерий – способность ферментативно расщеплять белки, полипептиды и пептоны. Изучают на питательных средах с желатином, молоком, сывороткой и др.

Молекула сахара
(глюкозы) состоит из 6 атомов углерода

(зубной налёт) наносят на предметное стекло бактериальной петлёй, растирают с пятикопеечную монету;
- мазок фиксируют над пламенем горелки;
- мазок окрашивают;
- промывают мазок водой;
- высушивают мазок фильтровальной бумагой и на воздухе;
- мазок микроскопируют.

СРЕДАХ) ИЗ ПРОБИРКИ ПЕТЛЁЙ ДЛЯ ПОСЕВА РАВНОМЕРНО; - ПРЕДВАРИТЕЛЬНО ОБЖИГАЮТ ГОРЛО ПРОБИРКИ И ПЕТЛЮ ДЛЯ ПОСЕВА; - ПЕРЕД ПОГРУЖЕНИЕМ ПЕТЛЮ ОХЛАДИТЬ О СТЕНКИ ПРОБИРКИ; - ПЕТЛЮ ВЫНИМАЮТ ИЗ ПРОБИРКИ, НЕ КАСАЯСЬ ЕЁ СТЕНОК; - ПРОБИРКУ ЗАКРЫВАЮТ ПОСЛЕ ОБЖИГАНИЯ ЕЁ ГОРЛА В ПЛАМЕНИ ГОРЕЛКИ; - МАЗОК ВЫСУШИВАЮТ НА ВОЗДУХЕ ПРИ КОМНАТНОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ ИЛИ ОКОЛО ПЛАМЕНИ ГОРЕЛКИ, ОКРАШИВАЮТ, ВЫСУШИВАЮТ, МИКРОСКОПИРУЮТ.

Техника приготовления мазка из бактериальной культуры, выращенной в пробирке:

(0,9%); - КУЛЬТУРУ СНИМАЮТ С ПЛОТНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ, ЭМУЛЬГИРУЮТ В КАПЛЕ НА СТЕКЛЕ; - МАЗОК ВЫСУШИВАЮТ, ОН ДОЛЖЕН БЫТЬ НЕ ГУСТЫМ, РАВНОМЕРНЫМ, ОКРАШИВАЮТ, ВЫСУШИВАЮТ, МИКРОСКОПИРУЮТ. СПОСОБЫ ФИКСАЦИИ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА НА ПРЕДМЕТНОМ СТЕКЛЕ: - ФИЗИЧЕСКИЙ (ТРОЕКРАТНО ПРОВОДЯТ СТЕКЛО С ВЫСОХШИМ МАЗКОМ НАД ВЕРХНЕЙ ЧАСТЬЮ ПЛАМЕНИ ГОРЕЛКИ 6 СЕКУНД); - ХИМИЧЕСКИЙ (С ПОМОЩЬЮ МЕТИЛОВОГО СПИРТА-5 МИНУТ; ЭТИЛОВЫМ СПИРТОМ-10 МИН).

Техника приготовления мазка из культуры, выращенной на плотной питательной среде:

2 МИН. 2. ИЗБЫТОК КРАСКИ СЛИТЬ В ЛОТОК, НА ПРЕПАРАТ НАНЕСТИ ПИ­ПЕТКОЙ НЕСКОЛЬКО КАПЕЛЬ РАСТВОРА ЛЮГОЛЯ НА 1 МИНУТУ. - НА ПРЕПАРАТ НАЛИТЬ НЕСКОЛЬКО КАПЕЛЬ СПИРТА, ОБЕСЦВЕЧИ­ВАНИЕ ПРОВОДИТЬ ДО ОТХОЖДЕНИЯ ФИОЛЕТОВЫХ КАПЕЛЬ — СТРУИ КРАСКИ, НО НЕ БОЛЕЕ 30 С. - МАЗОК ТЩАТЕЛЬНО ПРОМЫТЬ ВОДОЙ. - МАЗОК ДОКРАСИТЬ РАЗВЕДЕННЫМ ФУКСИНОМ — 2 МИН. БАКТЕРИИ СИНЕ- ФИОЛЕТОВОГО ЦВЕТА (ПОСЛЕ ОКРАШИВАНИЯ ЗАДЕРЖИВАЕТСЯ ГЕНЦИАН ФИОЛЕТОВЫЙ, Т.К. СУЖАЮТСЯ ПОРЫ МУРЕИНА ПОСЛЕ ОБРАБОТКИ СПИРТОМ) НАЗЫВАЮТСЯ ГР+, РОЗОВО- КРАСНЫЕ БАКТЕРИИ- ГР- (МУРЕИНА МАЛО, ГЕНЦИАН ФИОЛЕТОВЫЙ НЕ УДЕРЖИВАЕТСЯ, ПРЕПАРАТ ОКРАШИВАЕТСЯ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫМ КРАСИТЕЛЕМ- ФУКСИНОМ БОРДОВОГО ЦВЕТА).

Сложный способ окраски препарата по Граму (универсальный метод).

ознакомления с правилами поведения и режимом работы

2-все работники подвергаются профилактическим прививкам

3-каждый имеет халат колпак сменку

4-сотрудник обязан соблюдать личную гигиену,чистое рабочее место

5-поступающий материал регистрируют в журнал и маркируют

6-весь материал считается заразным. Ставят на специальный поднос а емкость с материалом протирают дез раствором снаружи

раствором. Жидкий материал отсасывают с помощью резинового баллона надетого на пипетку

8-при попадении ислед.материала на что либо то это обработать дез раствором

9-по окончанию работы все дезинфецируют раствором. Культура обеззараживается или сохраняют в холодильнике, который опечатывают. Материал требующий продолжения исследования ставят в термостат

10- в лаборатории запрещается принимать пищу и курить

11- в лаборатории ежедневно проводят влажную уборку. Ежедневно моют стены полы инвентарь горячей водой с мылом. Бокс убирают в конце рабочего дня а перед работой облучают бактерицидной лампой

Бактерии должны содержать все необходимые питательные вещества.
2. Изотоничность. Бактерии должны содержать набор солей для поддержания осмотического давления, определенную концентрацию хлорида натрия.
3. Оптимальный рН (кислотность) среды. Кислотность среды обеспечивает функционирование ферментов бактерий; для большинства бактерий составляет 7,2–7,6.
4. Оптимальный электронный потенциал, свидетельствующий о содержании в среде растворенного кислорода. Он должен быть высоким для аэробов и низким для анаэробов.
5. Прозрачность (чтобы был виден рост бактерий, особенно для жидких сред) 6. Стерильность (без др. бактерий)

среды, приготовленные из специально подготовленных природных компонентов (пептона, аминопептида, дрожжевого экстракта);
3) синтетические – среды известного состава, приготовленные из химически чистых неорганических и органических соединений (солей, аминокислот)

агар Хоттингера, пептонная вода, питательный желатин;
2) сложные – это простые с добавлением дополнительного питательного компонента (кровяного, шоколадного агара): сахарный бульон, желчный бульон, сывороточный агар, желточно-солевой агар, среда Китта—Тароцци, среда Вильсона—Блера и др.

(мясопептонный агар, мясопептонный бульон, кровяной агар);
2) специального назначения:
а) избирательные элективные – среды, на которых растут бактерии только одного вида (рода), а род других подавляется (щелочной бульон, 1 %-ная пептонная вода, желточно-солевой агар, казеиново-угольный агар;

из пептонной воды

По консистентности:

По составу:

Питательный желатин

видов по тем или иным свойствам, чаще биохимическим (среда Эндо, Левина, Гиса, Плоскирева и др.);
в) среды обогащения – среды, в которых происходит размножение и накопление бактерий-возбудителей какого-либо рода или вида, т. е. обогащение ими исследуемого материала (селенитовый бульон);
3) консервирующие (глицерин)

штриха обжигом петли, метод разведений в агаре, распределение по поверхности твёрдой питательной среды шпателем, метод Дригальского).
2. Использование элективных питательных сред.
3. Создание условий, благоприятных для развития одного вида (рода) бактерий (среды обогащения).
Чистую культуру получают в виде колоний